ショウジョウバエ中枢神経系培養細胞株を用いた細胞増殖阻害因子の研究

利用培养果蝇中枢神经系统细胞系研究细胞生长抑制因子

• 批准号: 05263223
• 负责人: 程 久美子
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Nippon Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05263223/
• 关键词: Drosophila; 中枢神経系; 培養細胞株; 細胞増殖; Anti-HRP antibody; Acetylcholine; L-dopa; 細胞生物学

ショウジョウバエ幼虫の中枢神経系(脳と腹側神経節)より継代培養可能な細胞株を樹立し、これらからクローン細胞株を16株得た。これらの細胞株の中には、昆虫の神経特異的マーカーとして知られている抗HRP抗体に対する反応性を常に持っている株と、この反応性が昆虫の変態ホルモンを与えることによって誘導されるものがあり、形態的にも数種のものに分類できた。さらに、神経細胞として特徴づけるために神経伝達物質についてHPLCを用いて調べた結果、アセチルコリンとカテコールアミンの前駆体であるL-dopaを持っているものがあることがわかった。(カテコールアミン類は検出できなかったが、L-dopaは哺乳類の神経細胞において脱分極作用を示すことが報告されており、新しい神経伝達物質候補である可能性が示唆されており、ショウジョウバエ神経細胞における役割は興味深い。)これらの結果から、得られているクローン株はそれぞれ異なる特徴を持ついくつかの神経細胞種のグループを表わすものと考えられる。神経細胞の細胞種間の相互作用を調べる目的で、異なる二種のクローン株の共存培養を行った結果、クローン株の組み合わせによって顕著な形態的変化が起こるもの、および細胞増殖の促進、または逆に阻害が起こるものがあることがわかった。さらにこれらの増殖調節作用は、メンブレンフィルターを介して二種のクローン株を培養しても同様の作用がみられたことから、細胞外へ分泌される物質によるものであると考えられる。これらの結果は同一の器官由来のクローン株の中に、細胞増殖に関しては、相反する作用を持つ物質を分泌しているものがあることを示しており生体における細胞増殖調節機構を調べるうえで非常に興味深いと考えられる。また、特に哺乳類の神経系細胞は、発生の早い時期に増殖し、増殖が停止し分化すると二度と分裂しない細胞群であるが、このような増殖停止の機構はほとんどわかっていない。したがってこの細胞増殖阻害物質の存在は特に興味深い。調べた数種の細胞株のうち、このような細胞増殖阻害作用を特に強く示す物質を分泌している細胞株はML-DmBG1であることがわかった。この物質は、自分自身には阻害作用を示さなかったが、他の中枢神経系由来細胞株には増殖を阻害する作用を示す。しかし、胚由来のKc細胞には増殖阻害作用を示さなかったので、この物質は神経系の細胞に特異的に作用するものかもしれない。この物質の性質を調べた結果、100℃,5分では失活しないが、100℃,20分では失活するものであること、キモトリプシン処理によって失活するものであることがわかった。さらに、分子量分画フィルターおよびゲルろ過により分子量を推定すると、60kd以上の比較的高分子のものであることがわかり、現在、この物質の単離を試みている。

The central nervous system (CNS) of the larvae was cultured in vitro and 16 cell lines were obtained. The anti-HRP antibody is usually used to induce the insect's neurogenesis. In addition, the characteristics of the neurons and the substances in the neurons were determined by HPLC. The results showed that the precursors of the neurons were L-dopa. (L-dopa shows depolarization in mammalian neurons.) The results of this study are as follows: 1. The characteristics of the different strains are different from those of the different strains. 2. The characteristics of the different strains are different from those of the different strains. 3. Interspecific interactions between neurons are regulated in order to promote cell proliferation and inhibit cell proliferation. The growth regulation of the two kinds of plants is related to the growth regulation of the two kinds of plants. The results are related to the origin of the same organ, the growth of cells, and the opposite effects. The secretion of substances in the body is also related to the regulation of cell growth. In particular, mammalian nervous system cells develop early in life, proliferate, stop, differentiate, divide, and divide into cell populations. The existence of cell proliferation inhibitors is particularly interesting. The cell line ML-DmBG1 has a strong inhibitory effect on cell proliferation. This substance is shown to inhibit proliferation of cell lines derived from other central nervous systems. The growth inhibition effect of Kc cells derived from embryos is demonstrated by the specific effect of these substances on the cells of the nervous system. The properties of the substance were adjusted to 100℃ for 5 minutes and 100℃ for 20 minutes. Molecular weight analysis, molecular weight estimation, molecular weight estimation

项目成果

Ui,K.: "Newly established cell lines from Drosophila larval CNS express neural specific characteristics." In Vitro Cell.Dev.Biol.in press.

Ui,K.：“新建立的果蝇幼虫中枢神经系统细胞系表达神经特异性特征。”

程久美子: "神経ペプチド-update 神経栄養因子性作用" Clin Neurosci.11. 1190-1191 (1993)

Kumiko Hodo：“神经肽更新神经营养因子的影响”Clin Neurosci.1190-1191（1993）。

Miyata,Y.: "Neurotransmitters in neuronal plasticity and psychiatric disorders.(International Congress Series No.1061)" Excerpta Medica, 103 (1993)

Miyata,Y.：“神经元可塑性和精神疾病中的神经递质。（国际大会系列第 1061 号）”医学摘录，103 (1993)

董巍: "神経ペプチド-update 神経ペプチド合成調節機構(1)" Clin Neurosci.12. 6-7 (1993)

董岩：“神经肽-更新神经肽合成调控机制(1)”Clin Neurosci.12-7(1993)。

程久美子: "神経ペプチド-update 神経ペプチド合成調節機構(2)" Clin Neurosci.13. 130-131 (1993)

Kumiko Hod：“神经肽更新神经肽合成调节机制（2）”Clin Neurosci.130-131（1993）。