癌細胞における細胞増殖の抑制的調節機構の異常

癌细胞中细胞增殖抑制调节机制的异常

• 批准号: 62015046
• 负责人: 堀尾 武一
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1987
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1987 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62015046/
• 关键词: 増殖阻害因子; 増殖因子; 細胞増殖; 癌; 細胞培養; 精製; ラウス肉腫ウイルス; 形質転換

癌細胞がもつ異常な増殖性の機構を解析するための一つの方法として, 正常細胞と癌細胞における増殖阻害因子の生産, および, それらの作用について検討した.正常ラット由来の上皮性肝細胞株BRL, および, BRLをラウス肉腫ウイルスで形質転換して得られた腫瘍細胞RSVーBRLを無血清培養液中で培養し, 細胞内と細胞外の増殖阻害因子を分析した. その結果, BRLの1M酢酸抽出液にはRSVーBRLに比べて約10倍量の酸可溶性増殖阻害因子が存在することが分かった. この増殖阻害因子(GIーI)はBRLの増殖を強く阻害するが, RSVーBRLに対しては殆ど阻害活性を示さなかった. BRLとRSVーBRL細胞はGIーIを分子量数十万の不活性な複合体として細胞外に分泌しており, その活性は1M酢酸(pH2.3)の処理によって約100倍に増大した. 一方, BRLとRSVーBRLは, GIーIと異なり, 両細胞に対して等しく増殖阻害活性を示す他の増殖阻害因子(GIーll)を活性な状態で細胞外に分泌した. RSVーBRLの無血清培養液から, 種々のクロマトグラフィとゲル電気泳動法を用いて両因子を完全に精製した. GIーIは2個の同一サブユニットからなる分子量26kの蛋白質で, pl7.0ー9.3の少なくとも5種のplアイソマー(主成分はpl9.3)を含んでいる. 一方, GIーllは1個のサブユニットからなる分子量45k, pl4.7の蛋白質であった. GIーIは酸に安定, 還元剤に不安定で, 既知の増殖阻害因子であるTGFーβと類似しているが, GIーllは酸に不安定, 還元剤に安定な因子で, 全く新種の増殖阻害因子である可能性が高い. 培養液中に分泌された増殖阻害因子は全体としてRSVーBRLよりもBRLを強く阻害する. このような増殖阻害因子の選択性が生体内での両細胞の増殖性の差異に関係する可能性が考えられる.

A method for analyzing the mechanism of abnormal proliferation in cancer cells and the production of growth inhibition factors in normal cells and cancer cells. Normal stem cells derived from epithelial liver cells BRL, BRL, RSV BRL, RSV BRL, As a result, BRL's 1M acid extract was about 10 times more acidic than RSV BRL. This growth inhibition factor (GI) strongly inhibits BRL growth and RSV BRL activity. BRL RSV BRL GI I molecular weight of hundreds of thousands of inactive complex, extracellular secretion, activity of 1M acetic acid (pH 2.3) treatment increased by about 100 times. On the one hand, BRL and RSV BRL are different from GI, which is secreted extracellular from cells in an active state indicating their proliferation inhibition activity. RSV BRL serum-free culture medium is completely purified by electrokinetic method. GI I contains 2 proteins of the same molecular weight 26k, pl7.0 - 9.3 and 5 pl proteins (main component pl9.3). One side, GI will be a protein with molecular weight of 45k, pl4.7. GI-I is acid stable, but not stable, and the probability of all new growth inhibition factors is high. The growth inhibition factors secreted in the culture medium are all related to RSV BRL and BRL. The possibility of the relationship between the selectivity of these growth inhibition factors and the differences in cell proliferation in vivo is examined.

项目成果

Keisuke Mashima: J.Bipchem.(1988)

真岛圭介：J.Bipchem.(1988)

Kaoru Miyazaki: Advances in Enzyme Regulation. 26. 225-237 (1987)

宫崎薰：酶调节的进展。

Norimasa Takizawa: J.Biochem.102. 741-753 (1987)

泷泽纪正：J.Biochem.102。

Keisuke Mashima: Biochem.Biophys.Res.Commun.148. 1215-1222 (1987)

真岛圭介：Biochem.Biophys.Res.Commun.148。

Kaoru Miyazaki: J.Biochem.102. 569-582 (1987)

宫崎薰：J.Biochem.102。