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時刻情報の生成・制御を支える転写因子群の発現プログラム

支持时间信息生成和控制的转录因子表达程序

基本信息

批准号：
15011213
负责人：
岡野俊行
金额：
$ 2.69万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

交付申請書に記載の研究計画に従い研究を遂行し、以下の知見を得た。【1】タンパク質レベルからの概日時計の発振プログラム解読これまでに同定した時計関連分子のうちA78およびE4BP4に重点をおき、蛋白質レベルでの解析を行った。その結果、A78は培養細胞中において中心体に局在することが判明した。概日時計の発振における中心体の役割は不明であるが、概日時計による細胞周期制御に関与する可能性が想定される。一方、E4BP4はニワトリ松果体において夕刻に限って転写が光誘導されるため、光位相後退に関わっている可能性を検討した。その結果、E4BP4蛋白質の発現に顕著なサーカディアンリズムが見られること、夕刻の光刺激によってmRNAレベルに加えて蛋白質量も増大することが判明した。さらに、時計関連キナーゼとして注目されているカゼインキナーゼによってE4BP4がリン酸化を受け、リン酸化によりプロテオソーム依存的に分解されることがわかった。これらの発見は、時計発振においてE4BP4が「いつ、どこで、何を」しているのかという時計発振プログラムの一端を明らかにしたものと言える。【2】個体レベルからの概日時計のリセットプログラム解読個体レベルにおける概日時計のリセットプロセスを解明するために、時計中枢の一つである松果体において時計機能を破壊したゼブラフィッシュの作製を試みた。まず、時計発振の中心的役割を担うBMAL分子のC末端領城を欠失した変異蛋白質を用い、これが時計発振に対してドミナントネガティブ効果を示すことを見いだした。次に、この変異BMAL蛋白質の遺伝子に松果体特異的プロモータを繋ぎ、松果体に変異BMALを発現するトランスジェニックゼブラフィッシュを作製した。その結果、変異遺伝子導入系統として複数のゼブラフィッシュ系統を樹立することに成功した。

The submission of the application, the record of the research plan, the completion of the study, and the following comments have been accepted. [1] it is necessary to use the same time to determine the key points of molecular analysis, A78, E4BP4, protein and protein analysis. According to the results of the experiment, the central somatosomal bureau in the A78 cell was able to identify the disease. It is estimated that the centrosome of the vibration device is used to cut the unknown cell cycle, to control the cell cycle and to determine the possibility of the cell cycle. One party, E4BP4, pineal gland, pineal gland and pineal gland. The results showed that the E4BP4 protein concentration was significantly higher than that of the control group (P < 0.05). The results showed that the E4BP4 protein concentration was significantly higher than that of the control group (P < 0.05). The results showed that the light stimulation, the light stimulation, the protein dose, the protein content, the protein In the past few years, we have paid close attention to the impact of environmental pollution on E4BP4 acidification, acidification, and on-the-spot data analysis. Let's hear and talk about the E4BP4. Let's talk at the end of the conversation. [2] the average daily time of the pineal cycle is calculated, and the pineal gland test machine is used to make a test. The service cutting device in the center of the clock and timing vibration center is responsible for the loss of protein in the C-terminal of the BMAL molecule. The second, the BMAL protein, the pineal gland, the pineal gland, the BMAL, the pineal gland, the pineal gland. The result of the test shows that the system system has successfully failed to enter the system copy number.