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ES細胞からの内胚葉細胞系譜制御遺伝子プロファイリング解析

ES 细胞的内胚层细胞谱系控制基因谱分析

基本信息

批准号：
15011246
负责人：
粂昭苑
金额：
$ 3.84万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

申請者らが構築したES細胞から膵への分化誘導系において、アフリカツメガエルのmixファミリーのニワトリホモログであるc-mix遺伝子を強制発現させた結果、膵への分化誘導能が促進されたことを見い出している。このc-mix遺伝子強制発現ES細胞株と、対照株との遺伝子発現プロファイリング解析を行い、内胚葉誘導に関与する遺伝子群の同定出来ると考えられた。本研究ではDNAチップを用いた遺伝子解析を行なうと共に、rt-pcr法により、遺伝子導入株では内胚葉分化マーカーの発現が上昇していることを示した。今後はここで絞られた候補について、さらにアフリカツメガエル初期胚で強制発現させ、内胚葉誘導活性についてスクリーニングを続ける予定である。さらに、pdx-1-GFPトランスジェニックマウスより、ES細胞を樹立し、生きた状態でpdx-1の遺伝子発現を追跡可能の系を確立した。また、申請者らはこれまでに、ES細胞からの膵への分化誘導を支持する細胞を複数同定してきた。これら支持細胞を用いて、ES細胞から膵へ効率良く分化誘導された。さらに、ES細胞からの分化誘導の条件を無血清条件でアッセイできる系を確立し、TGFβ2を添加することにより、顕著な膵分化誘導を認めた。このように、これまでに確立した実験系では、充分に効率よくES細胞から膵へ分化を誘導することができたので、ES由来の膵幹細胞を今後セルソーターを用いて純化し、遺伝子発現プロファイリングなどによる細胞生化学的解析を進めようと考えている。

The applicant has constructed a differentiation inducing system for ES cells, and the differentiation inducing system for ES cells has been developed under stress. C-mix gene stress induced ES cell lines, control lines, gene expression analysis, endodermal induction and gene identification In this study, we analyzed the DNA sequence using RT-PCR and showed that the embryo differentiation of the introduced plants increased. In the future, the stress of early embryo development and endoblast induction activity will be determined. In addition, pdx-1-GFP can be used to detect ES cell growth, growth, and gene expression. For example, the applicant may be able to identify multiple ES cells that support differentiation. These cells are used for cell culture and ES cells are induced to differentiate. In addition, the differentiation of ES cells was induced under serum-free conditions, and the differentiation of ES cells was induced by TGFβ2. This is the first time that ES cells have been identified and differentiated. This is the first time that ES cells have been identified and differentiated. This is the first time that ES cells have been purified and developed.