遺伝子改変マウスを用いた中枢神経系の多様な細胞を生み出すメカニズムについての解析

利用转基因小鼠分析中枢神经系统中产生多种细胞的机制

• 批准号: 15016112
• 负责人: 竹林 浩秀
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15016112/
• 关键词: Cre; 運動ニューロン; オリゴデンドロサイト; 細胞系譜; GABAニューロン; Olig2; 転写因子; アストロサイト

本申請では、中枢神経系において、多種多様な細胞を生み出すメカニズムの一端を明らかにする目的でbasic helix-loop-helix型転写因子のOligファミリーの機能解析を行っている。本年度は、まずOlig2遺伝子座にタモキシフェン誘導性CreリコンビナーゼをノックインしたOlig2-CreERマウスとレポーターマウス(CAG-CAT-Zマウス:大阪大学・宮崎純一先生より供与)を掛け合わせて、タモキシフェン投与により、時期特異的な細胞系譜追跡実験を行った。近年、脊髄のオリゴデンドロサイトは運動ニューロンと共通の系譜として生み出されること、また、アストロサイトは、この細胞系譜から生み出されないことが示唆されている。しかし、我々の時期特異的な細胞系譜追跡実験より、Olig2陽性細胞は、運動ニューロン、オリゴデンドロサイト以外にも少数のGFAP陽性のアストロサイト様の細胞に分化すること明らかとなった。今回確立した、時期特異的な遺伝子組み換えシステムは、これらの細胞系譜の分化メカニズム解析の非常に有用なツールになると考えられる。(投稿準備中)脊髄において、Olig2は、運動ニューロンとオリゴデンドロサイトの発生に必須の因子であることがわかっている。しかし、前脳における役割は、不明な点が多い。例えば、Olig2ノックアウトマウスの前脳において、オリゴデンドロサイトが激減するが、ニューロンの表現系については全くわかっていない。本年度は、オリゴデンドロサイトと同様に腹側で発生し、接線方向の移動を行う大脳皮質GABAニューロンに着目し、Olig2ノックアウトマウスの表現系について調べた。残念ながら、現在までOlig2ノックアウトマウスと野生型マウスの間に明らかな差は見つかっていない。今後、GABAニユーロンのサブタイプ分類に着目して、さらに詳細に検索する予定である。

This application で は, central god 経 に お い て, many many others な cells born を み out す メ カ ニ ズ ム の end を Ming ら か に す helix で る purpose, basic planning - loop - helix type write factor の Olig フ ァ ミ リ ー の line function analytical を っ て い る. This year は, ま ず Olig2 prevented heritage 伝 stroma に タ モ キ シ フ ェ ン induced Cre リ コ ン ビ ナ ー ゼ を ノ ッ ク イ ン し た Olig2 prevented - CreER マ ウ ス と レ ポ ー タ ー マ ウ ス (the CAG - CAT - Z マ ウ ス : Osaka university, Mr Miyazaki his よ り) and supply を hang け close わ せ て, タ モ キ シ フ ェ ン cast with に よ り and when Specific な cell pedigree tracing experiments を rows った. In recent years, spinal marrow の オ リ ゴ デ ン ド ロ サ イ ト は movement ニ ュ ー ロ ン と common の pedigree と し て raw み out さ れ る こ と, ま た, ア ス ト ロ サ イ ト は, こ の cells pedigree か ら raw み out さ れ な い こ と が in stopping さ れ て い る. し か し, I 々 の specific な cells during the period of pedigree tracing be 験 よ り, は Olig2 prevented positive cells, movement ニ ュ ー ロ ン, オ リ ゴ デ ン ド ロ サ イ ト outside に も minority の GFAP positive の ア ス ト ロ サ イ ト others の cells に す る こ と Ming ら か と な っ た. Today back to establish し た な of period, specific 伝 subgroups み in え シ ス テ ム は, こ れ ら の cells pedigree の メ カ ニ ズ ム parsing の very useful に な ツ ー ル に な る と exam え ら れ る. Contribute (prepare) spinal marrow に お い て, Olig2 prevented は, sports ニ ュ ー ロ ン と オ リ ゴ デ ン ド ロ サ イ ト の 発 raw に must の factor で あ る こ と が わ か っ て い る. <s:1> な, former 脳における service cut 脳における, unknown な points が many 脳における. Example え ば, Olig2 prevented ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス の before 脳 に お い て, オ リ ゴ デ ン ド ロ サ イ ト が shock reduction す る が, ニ ュ ー ロ ン の performance department に つ い て は full く わ か っ て い な い. This year は, オ リ ゴ デ ン ド ロ サ イ ト と with others in the ventral に で 発 し, connection line direction の mobile を う big 脳 cortex GABA ニ ュ ー ロ ン に mesh し, Olig2 prevented ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス の performance department に つ い て adjustable べ た. Remnants read aloud な が ら, now ま で Olig2 prevented ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス と wild-type マ ウ ス の に between Ming ら か な poor は see つ か っ て い な い. In the future, GABA ニ ユ ー ロ ン の サ ブ タ イ に プ classification with mesh し て, さ ら に detailed に 検 cable す る designated で あ る.

项目成果

Yokoo H, Nobusawa N., Takebayashi H., Ikenaka K., Isoda K, Kamiya M, Sasaki A, Hirato J, Nakazato Y: "Anti-human Olig2 antibody as a useful immunohistochemical marker of normal oligodendrocytes and glomas."Am J Pathol. (in press). (2004)

Yokoo H、Nobusawa N.、Takebayashi H.、Ikenaka K.、Isoda K、Kamiya M、Sasaki A、Hirato J、Nakazato Y：“抗人 Olig2 抗体作为正常少突胶质细胞和神经胶质瘤的有用免疫组织化学标记。”Am J

Ding H, Shannon P, Lau N, Wu X, Roncari L, Baldwin RL, Takebayashi H, Nagy A, Gutmann DH, Guha A: "Oligodendrogliomas result from the expression of an activated mutant epidermal growth factor receptor in a RAS transgenic mouse astrocytoma model."Cancer Re

Ding H、Shannon P、Lau N、Wu X、Roncari L、Baldwin RL、Takebayashi H、Nagy A、Gutmann DH、Guha A：“少突胶质细胞瘤是由 RAS 转基因小鼠星形细胞瘤中激活的突变型表皮生长因子受体的表达引起的

Fukuda S, Kondo T, Takebayashi H, Taga T: "Negative regulatory effect of an oligodendrocytic bHLH factor OLIG2 on the astrocytic differentiation pathway."Cell Death Differ. 11(2). 196-202 (2004)

Fukuda S、Kondo T、Takebayashi H、Taga T：“少突胶质细胞 bHLH 因子 OLIG2 对星形胶质细胞分化途径的负调节作用。”细胞死亡不同。

Ivanova A, Nakahira E, Kagawa T, Oba A, Wada T, Takebayashi H, Spassky N, Levine J, Zalc B, Ikenaka K.: "Evidence for a second wave of oligodendrogenesis in the postnatal cerebral cortex of the mouse."J Neurosci Res. 73(5). 581-592 (2003)

Ivanova A、Nakahira E、Kakawa T、Oba A、Wada T、Takebayashi H、Spassky N、Levine J、Zalc B、Ikenaka K.：“小鼠出生后大脑皮层中第二波少突胶质细胞生成的证据。”J

Iwasaki Y, Hosoya T, Takebayashi H, Ogawa Y, Hotta Y, Ikenaka K: "The potential to induce glial differentiation is conserved between Drosophila and mammalian glial cells missing genes."Development. 130(24). 6027-6035 (2003)

Iwasaki Y、Hosoya T、Takebayashi H、Okawa Y、Hotta Y、Ikenaka K：“诱导神经胶质分化的潜力在果蝇和缺失基因的哺乳动物神经胶质细胞之间是保守的。”开发。