NMDA受容体のMg2+ブロック特性が学習・記憶形成に果たす役割の遺伝学的解析

NMDA 受体 Mg2+ 阻断特性在学习和记忆形成中作用的遗传分析

• 批准号: 15016128
• 负责人: 齊藤 実
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15016128/
• 关键词: ショウジョウバエ; Mg^<2+>ブロック; 学習記憶; NMDA受容体

ショウジョウバエゲノムデーターベースの解析から、我々はすでにクローニングされているNR1ホモログDNR1に加え、新たにNR2ホモログDNR2をクローニングした。DNR2はこれまでクローニングされているNRやDNR1とは対照的にMg^<2+>ブロックに大事なM2領域のAsn(N)がGln(Q)になっていた。発現領域を調べたところDNR1 proteinは頭部でのみ発現が認められ、キノコ体、antennal lobe、optic lobeなど、シナプスの多く存在する部位に存在した。また、DNR-2 mRNAもoptic lobeやantennal lobe、paras intercerebralis等の細胞に発現しDNR1との共存が伺えた。機能解析を行うためアフリカツメガエルの卵母細胞に野生型DNR1,DNR2を発現させ電気生理学的な性質を調べたところ、NMDA、Glutamateに対する濃度依存性の受容体電流が観察された。しかしMg^<2+>ブロックをはじめ、多くのブロッカーによる受容体電流の抑制は見られず、逆にNMDA/glutamate binding siteに作用するブロッカー、APV、CPPはそれ自体がDNRを活性化した。次いで、ショウジョウバエ培養細胞で野生型DNR1,DNR2を発現させて解析を行ったところ、Mgブロックと思われる整流作用が観察された。DNRのM2領域アミノ酸に変位を入れたトランスジェニックフライDNR1^*(Q)、DNR2^*(N)を作成し、匂い条件付けによる1時間記憶の解析を行ったところDNR1^*(Q)の過剰発現体では顕著な匂い記憶の低下が起こっていたが、DNR2^*(N)の過剰変異体では明確な変化は見出せなかった。今後、行動解析で得られた結果とMg^<2+>ブロックを中心とした電気生理学的性質との相関を明確にするため培養細胞系での解析を継続する。

It is necessary to analyze and analyze the situation of NR1 and NR2 in order to improve the situation of NR1 and NR2. DNR2 is the domain of Asn(N) and Gln(Q). The DNR1 protein is found in many parts of the brain, including the brain, antenna lobe, optic lobe, and other parts. DNR-2 mRNA is expressed in cells such as optic lobe, antenna lobe and paras intercerebralis. Functional analysis of wild-type DNR1, DNR2 in oocytes revealed electrophysiological properties modulated by NMDA, Glutamate and concentration-dependent receptor currents. The inhibition of receptor current by Mg^<2+>, APV, CPP and DNR is observed in the reverse NMDA/glutamate binding site. The expression of DNR1 and DNR2 in cultured cells was examined by enzyme digestion and enzyme digestion. DNR's M2 domain has been modified to include the following elements: DNR1^*(Q), DNR2 ^*(N), DNR2^*(N), DNR1 ^*(Q), DNR2^*(N), DNR2 ^*(N), DNR1^*(Q), DNR2^*(N), DNR2^*(N), In the future, the results of the action analysis will be clear, and the relationship between the properties of electrophysiology and culture cell lines will be analyzed.

项目成果

Tamura T, Chang AS, Ito N, Liu HP, Horiuchi J, Tully T, Saitoe M: "Aging specifically impairs amnesiac-dependent memory in Drosophila."Neuron. 40. 1003-1011 (2003)

Tamura T、Chang AS、Ito N、Liu HP、Horiuchi J、Tully T、Saitoe M：“衰老特别损害果蝇的遗忘依赖性记忆。”神经元。