抗赤血球寄生性原虫活性を示すペプタイド治療薬の探索

寻找具有抗红细胞原生动物活性的治疗肽

基本信息

项目摘要

本研究の目的は、各種動物赤血球に吸着活性を示すペプタイド配列の一覧パネルを作製し、赤血球内寄生性原虫の爆発的増殖を阻止できるペプタイド治療薬を探索することであった。成果達成のために、1)各種動物赤血球に高い親和性を示すPeptide display phage(PDF)の精製とそのペプタイド配列の同定、2)吸着が確認された各種PDPによるバベシア原虫の増殖抑制効果の評価、3)抗標的ペプタイド免疫血清と各種原虫由来cDNA expression phage libraryを用いた原虫由来赤血球吸着リガンドのイムノクローニング、4)遺伝子発現産物の赤血球吸着能の検証、5)遺伝子導入組換えバベシア原虫を用いた遺伝子発現産物の機能解析、6)赤血球側受容体の同定を計画した。現在までに、バベシア原虫の感染には赤血球側のシアル酸分子が受容体として重要な働きをしていることを見いだし、PDF libraryよりウシの生赤血球膜上のシアル酸に吸着活性を示すPDP群の精製に成功した。このPDP群はIn vitro培養におけるウシバベシア原虫の増殖を有意に抑制した。さらに、このPDP群を免疫したマウス血清は、バベシア感染血液塗末標本を用いた間接蛍光抗体法により原虫のみを認識することを発見し、かつ本マウス血清を添加した培養液中ではバべシア原虫の増殖が有意に抑えられることを見いだした。現在、このマウス血清とウシバベシア原虫のcDNA expression phage libraryを活用して原虫側のシアル酸認識リガンドを探索しており、この分子相互作用を解き明かすことで有効なペプタイド治療薬の構築が可能となると考えている。
The purpose of this study was to explore ways to prevent the proliferation of parasites in erythrocytes and to prevent the proliferation of parasites in erythrocytes by showing the adsorption activity of erythrocytes in various animals 1) Purification and alignment of Peptide display phase (PDF) for high affinity of erythrocytes in various animals; 2) Identification of inhibitory effects on the proliferation of protozoa in various PDP; 3) Identification of anti-target immune serum for protozoa cDNA expression phase library; 4) Identification of erythrocyte adsorption capacity of gene expression products, 5) Functional analysis of gene expression products in gene introduction assembly, 6) Identification of erythrocyte receptor. Now, the purification of PDP population was successfully demonstrated by PDF library, which showed the adsorption activity of erythrocyte on erythrocyte membrane. The PDP population was intentionally inhibited from propagating In vitro. In addition, the serum of PDP group was added to the culture medium to inhibit the growth of protozoa. Now, the cDNA expression phage library of this virus serum is used to explore the understanding of protozoan side RNA, and the molecular interaction of this virus is analyzed.

项目成果

期刊论文数量(12)
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Bork S, Yokoyama N, Ikehara Y, Kumar S, Sugimoto C. Igarashi I.: "Growth-inhibitory effect of heparin on Babesia parasites"Antimicrob Agents Chemother.. 48(1). 236-241 (2004)
Bork S、Yokoyama N、Ikehara Y、Kumar S、Sugimoto C. Igarashi I.:“肝素对巴贝虫寄生虫的生长抑制作用”Antimicrob Agents Chemother.. 48(1)。
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Kim, J.-Y., Yokoyama, N., Kumar, S., Inoue.N., Yamaguchi, Y., Sentoku, S., Fujisaki, K., Sugimoto, C.: "Molecular Epidemiological Survey of Benign Theileria Parasites of Cattle in Japan : Detection of a New Type of Major Piroplasm Surface Protein Gene."J.
Kim, J.-Y.、Yokoyama, N.、Kumar, S.、Inoue.N.、Yamaguchi, Y.、Sentoku, S.、Fujisaki, K.、Sugimoto, C.:“良性泰勒虫的分子流行病学调查
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Tamaki, Y., Hirata, H., Takabatake, N., Bork, S., Yokoyama, N., Xuan, X., Fujisaki, K., Igarashi, I.: "Molecular cloning of a Babesia caballi gene encoding the 134-kilodalton protein and evaluation of its diagnostic potential in an enzyme-linked immunosor
Tamaki, Y.、Hirata, H.、Takabatake, N.、Bork, S.、Yokoyama, N.、Xuan, X.、Fujisaki, K.、Igarashi, I.:“编码巴贝斯虫基因的分子克隆
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    0
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Kumar, S., Yokoyama, N., Kim, J.-Y., Huang, X., Inoue, N., X.Xuan, H., Igarashi, I., Sugimoto, C.: "Expression of Babesia equi EMA-1 and EMA-2 during merozoite developmental stages in erythrocyte and their interaction with erythrocytic membrane skeleton."
Kumar, S.、Yokoyama, N.、Kim, J.-Y.、Huang, X.、Inoue, N.、X.Xuan, H.、Igarashi, I.、Sugimoto, C.:“马巴贝虫的表达
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Huang, X., Xuan, X., Xu, L., Zhang, S., Yokoyama, N., Suzuki, N., Igarashi, I.: "Development of an immunochromatographic test with recombinant EMA-2 for the rapid detection of antibodies against Babesia equi in horses."J.Clin.Microbiol.. 42・1. 359-361 (20
Huang, X.、Xuan, X.、Xu, L.、Zhang, S.、Yokoyama, N.、Suzuki, N.、Igarashi, I.:“开发用于快速检测的重组 EMA-2 免疫色谱测试马体内抗马巴贝虫抗体的研究。”J.Clin.Microbiol.. 42・1. 359-361 (20
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横山 直明其他文献

IMMUNOSCREENING OF BABESIA RODHAINI GENES ENCODING IMMUNOGENIC PROTEINS FROM THE CDNA EXPRESSION PHAGE LIBRARY
对 CDNA 表达噬菌体库中编码免疫原性蛋白质的罗氏巴贝虫基因进行免疫筛选
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 期刊:
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  • 作者:
    K. Fujii;N. Takabatake;S. Boonchit;H. Hirata;N. Yokoyama;I. Igarashi;横山 直明;郁男 五十嵐
  • 通讯作者:
    郁男 五十嵐
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牛巴贝虫BvP36基因至少在巴贝虫裂殖子的无性阶段表达。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2009
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  • 作者:
    A. Khukhuu;T. Sivakumar;A. Alhassan;N. Ota;N. Yokoyama;I. Igarashi;横山 直明;郁男 五十嵐
  • 通讯作者:
    郁男 五十嵐
小型ピロプラズマ主要膜抗原と結合する宿主因子の解析
与小梨原体主要膜抗原结合的宿主因子的分析
  • DOI:
  • 发表时间:
    2013
  • 期刊:
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  • 作者:
    竹前 等;杉 達紀;高野 量;村越 ふみ;Recuenco Frances C.;石和 玲子;堀本 泰介;横山 直明;加藤 健太郎
  • 通讯作者:
    加藤 健太郎
FUCOIDAN INHIBITS THE IN VITRO GROWTH OF BABESIA BOVIS
褐藻糖胶抑制牛巴贝斯虫的体外生长
  • DOI:
  • 发表时间:
    2004
  • 期刊:
  • 影响因子:
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  • 作者:
    N. Takabatake;Shintaro Hashiba;S. Bork;M. Okamura;N. Yokoyama;I. Igarashi;横山 直明;郁男 五十嵐
  • 通讯作者:
    郁男 五十嵐
フタトゲチマダニ卵におけるBabesia ovata β-チューブリン遺伝子の検出
硬蜱卵中卵形巴贝斯虫 β-微管蛋白基因的检测
  • DOI:
  • 发表时间:
    2016
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    白藤(梅宮) 梨可;八田 岳士;大久保 和洋;佐藤 萌子;前田 大輝;横山 直明;五十嵐 郁男;藤崎 幸蔵;辻 尚利
  • 通讯作者:
    辻 尚利

横山 直明的其他文献

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牛小型ピロプラズマ病を引き起こす牛タイレリアの生体内増殖メカニズムの解明
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  • 资助金额:
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转基因巴贝斯虫原虫生产方法的建立及其应用
  • 批准号:
    13760204
  • 财政年份:
    2001
  • 资助金额:
    $ 2.94万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
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