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Research on the development of international standard serodiagnoses for equine piroplasmosis

马梨形体病国际标准血清诊断方法的制定研究

基本信息

批准号：
22KK0095
负责人：
横山直明
金额：
$ 12.81万
依托单位：
Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Fund for the Promotion of Joint International Research (Fostering Joint International Research (B))
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-10-07 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

馬ピロプラズマ病とは、赤血球内寄生性原虫である馬ピロプラズマ（馬タイレリアもしくは馬バベシア）が、マダニの吸血によって伝播する海外悪性伝染病である。本原虫は世界に広く分布し、さらに拡大傾向にあることから、馬の国際移動に伴う水際防疫においては血清診断による厳格な陽性馬の摘発が行われている。しかしながら、現行の血清診断法には致命的な欠陥があることが指摘され、しばしば大きな社会問題を引き起こしている。そこで本研究は、モンゴル国で多発している馬ピロプラズマ病の罹患馬を研究対象に、現行の血清診断法の問題点を科学的に実証し、その成果に基づいて新たな血清診断法を開発する。本提案研究では、特にモンゴル国で放牧されている感染馬から多彩な遺伝子型の馬ピロプラズマ原虫の分離・培養を試み、それぞれの分離株の性状解析や馬の感染試験を通して、馬ピロプラズマ病に対する国際標準血清診断法の開発研究を加速するための国際学術基盤を構築する。2022年度では、遺伝子診断と顕微鏡診断により、モンゴル国内で放牧されている馬から感染個体を抽出し、その感染馬から馬ピロプラズマ感染血液を回収した。感染血液は日本に搬入し、帯広畜産大学・原虫病研究センターにて試験管内培養による分離培養を行なった。その結果、試験管内で持続培養できる馬タイレリアの野外分離株の樹立に成功した。また、馬タイレリアの遺伝子型を鑑別できる新たな遺伝子診断法（タイピングPCR法）の開発にも成功した。現在、回収した馬血清を用いてcELISAとIFATによる診断比較を行い、現行診断法の問題点を検証している。

The disease is caused by parasitic protozoa in red blood cells. The distribution of protozoa in the world, the tendency of the international movement of horses, the tendency of the international movement of protozoa, the international movement of protozoa, The current serological diagnosis method is not only fatal, but also social. This study aims to provide scientific evidence for the problems of current serological diagnosis methods and to develop a new serological diagnosis method based on the results of this study. This proposal aims to accelerate the development of international standard serological diagnostic methods for infected horses and establish an international academic base for the isolation, culture and characterization of isolated strains. In 2022, the virus diagnosis and microscopical diagnosis were carried out. The infected individuals were extracted from the infected horses and the infected blood was collected. Infected blood was transferred to Japan, and the isolation culture was carried out in the laboratory. The results showed that the culture in vitro was successful and the wild isolates were successfully established. The development of a new gene diagnosis method (PCR method) for the identification of gene types in human beings has been successful. Now, we will review the diagnostic comparison between cELISA and IFAT, and examine the problem points of current diagnostic methods.