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家畜バベシア症に対する迅速・簡便な新規遺伝子診断法の開発と薬剤標的の検索

一种快速简便的家畜巴贝斯虫病基因诊断新方法的开发及药物靶点的寻找

基本信息

批准号：
10F00420
负责人：
横山直明
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010 至 2012
项目状态：
已结题

项目摘要

バベシア症は、ダニによって媒介されるバベシアが宿主動物の赤血球に寄生して、発熱、貧血、黄疸等の症状を呈する原虫感染症であり、家畜や犬などで世界的に認められておりで毎年数兆円にのぼる経済的被害をうけている。本研究では、家畜バベシア症に対する新規の迅速・簡便遺伝子診断法の開発と新規治療薬の検索を目的に、以下の項目について検討した。1)新規の遺伝子の検索と診断法および予防法への応用研究これまで、B. bovisの微細構造であるスフェリカルボディー4の組換えBbSBP-4蛋白質(BbSBP-4)を用いたELISAは最も高い特異性と感度を有することを明らかにした。また、牛バベシアB. bigemina AMA-1遺伝子を特異的に検出するnested PCRを開発した。24年度は、馬バベシアB. caballiのロプトリー蛋白質を効率よく産生する方法を開発した。これらの方法を用いて、モンゴルの牛および馬のバベシア症に関する分子疫学的調査を行った。その結果、B. bigemina, T. equi, B. caballiがモンゴルにおいて高率に感染し、モンゴルに特有な遺伝子配列が存在することが明らかとなった。2)アピコプラスト等をターゲットにした新規治療薬の検索これまでバベシア原虫のアピコプラストが薬剤標的として有望であることを、遺伝子解析、DNAの転写阻害剤、アピコプラストの重要な酵素であるペプチド脱ホルミル酵素の阻害剤を用いた実験により、明らかにしてきた。24年度は、牛バベシアBabesia bigeminaヒートショック蛋白質(BbigHSP-70)の遺伝子解析を行った。更に組み替え抗原を作製し、これに対する抗血清がB. bigemina, B. bovis, B. caballi, B. gibsoni,とB. microtiの溶解抗原と反応することが示された。更に、BbigHSP-70で免疫したマウスは非免疫群に比較して、B.microtiの攻撃感染に対し強い免疫効果を示すことが明らかにされた。さらに、Babesia bovisのヒストン脱アセチル化酵素(HDAC)の分子生物学的解析を行い、その阻害剤であるアピシジンが培養バベシアの増殖抑制を示した。今後、これらはバベシア症に対する新たな薬剤として更に検討にすることが期待される。

Symptoms of バベシア syndrome, ダニによって medium, erythrocyte parasitism of the host animal, fever, anemia, jaundice, etc. The protozoal infection caused by the disease is caused by the disease, and the domestic animals and dogs in the world are killed by the disease every year for many years. The purpose of this study is to develop a new rapid and simple diagnosis method for livestock disease and to develop a new treatment method for livestock disease. The following projects are intended to be used. 1) Research on the application of new regulations, diagnostic methods, preventive methods, and new regulations, B. Bovis's microstructure of BbSBP-4 protein (BbSBP-4 protein) bSBP-4) has the highest specificity and sensitivity using ELISA and has the best performance.また, 牛バベシアB. bigemina AMA-1 缝子をspecific に検出するnested PCR を开発した. 24 years of は, horse バベシアB. caballi のロプトリーprotein を efficiency よく production する method を开発した. The method of using これらのを using いて, the モンゴルの牛および马のバベシア disease and the investigation of molecular epidemiology を行った.そのRESULT, B. bigemina, T. equi, B. The caballi infection rate is high, and the caballi infection is a unique disease. 2) アピコプラストをターゲットにしたNew Regulations Treatment 薬の検SO これまでバThe ベシア protozoa のアピコプラストが薬剤扤级として hopefully であることを、缝Sub-analyses, DNA blockers, and enzymes that are essential enzymesいた実験により、明らかにしてきた。 In the 24th year of the year, the analysis of the remaining parts of the Babesia bigemina ヒートショック protein (BbigHSP-70) was carried out. Updated group of anti-antigens and anti-serums for B. bigemina, B. bovis, B. caballi, B. gibsoni, B. microti and dissolved antigens and anti-antigens. More details, BbigHSP-70 is immune to non-immune groups and has a strong immune effect.さらに、Babesia Analysis of the molecular biology of bovis HDACを行い, その hinder the cutting of the であるアピシジンが culture バベシアのproliferation inhibition をshow した. From now on, we are looking forward to the new たな薬剤として and the new に検にすることがされる.