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マラリア原虫スポロゾイトの肝臓細胞への感染機構

疟原虫子孢子感染肝细胞的机制

基本信息

批准号：
15019042
负责人：
鎮西康雄
金额：
$ 4.16万
依托单位：
Mie University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

マラリア原虫のオオシスト及び唾液腺から調整したスポロゾイトのEST解析を行い、熱帯熱マラリアゲノムにホモローグのあるもので、構造的に接着性ドメインを持つとか細胞侵入に関わる既知分子との相同性を持つ分子とか検索分類整理し、14個のcDNAクローンを選定し、解析した。すでに機能が同定できているSPECT(sporozoiteprotein essential for cell traverse)について報告する。SPECTの抗体を作製し、Western Blotを行ってSPECTを検出したところ、中腸オオシスト内のスポロゾイトでの発現はなく、唾液腺に入った後のスポロゾイトではじめて発現することが判った。同じ抗体を用いて、免疫電顕を行って細胞内での分布を検討した結果、SPECTはミクロネームという分泌オルガネラに局在することが判明した。SPEC遺伝子をノックアウトした原虫を作製し、その表現形について様々な角度から検討した。KO原虫はマウス体内でのメロゾイトの発育に関しては全く影響しなかった。またハマダラカの吸血によって蚊の体内に入ってからの発育等についても野生株原虫と同等であった。KO原虫を感染した蚊の唾液腺からスポロゾイトを回収し、ネズミへの注射によって感染させたところ、感染効率が野生株原虫に比べて、約10分の1に落ちていた。このKO原虫スポロゾイトを用いin vitro系で培養肝細胞(HepG2)に感染させたところ、感染性に差はなかった。また、HeLa細胞への侵入・通過を調べたがこれも野生株と同等であった。以上のことから、SPECTは唾液腺に入ったスポロゾイトで特異的に発現し、肝臓への感染に重大な機能を持つ分子であることが判った。

During the EST analysis of the oosters of the malaria parasites and the adjustment of the salivary glands, the hot spots of the malaria parasites, the similarities between the structures and the known molecules related to cell invasion, and the classification of the molecules, 14 cDNA clones were selected and analyzed. SPECT(sporoproteine essential for cell traverse) is the same function. SPECT antibody production, Western Blot detection, midgut detection, salivary gland detection The results of the study of intracellular distribution of antibodies and immunoreceptors, and SPECT were identified. SPEC is the only way to improve the quality of the products. Ko protozoa has a strong influence on the development of the organism. In addition to the above, it is also possible to detect the presence of a large number of wild protozoa. The infection rate of KO protozoa was about 10 minutes higher than that of wild protozoa. Ko protozoa are used in vitro culture of hepatocytes (HepG2). HeLa cells are invasive, but they are not. The above results show that SPECT can detect and detect salivary gland infection and liver infection.