マラリア肝内型原虫の感染維持機構の解明

阐明肝内疟原虫的感染维持机制

• 批准号: 15019043
• 负责人: 油田 正夫
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15019043/
• 关键词: マラリア; スポロゾイト; EST; 翻訳制御; 遺伝子ノックアウト

本研究ではマラリア原虫の肝細胞内寄生の分子的基盤を明らかにすることを目的とし、原虫遺伝子の発現解析、およびそれらの遺伝子の逆遺伝学的手法を用いた機能解析をおこなった。今年度以下の成果を上げた。1.中腸スポロゾイトおよび唾液腺スポロゾイトのESTの大量解析をおこなった。解析したEST数はそれぞれ1-2万である。解析データは今後、一般に公開する予定である。このことを視野に入れて、現在データベース化の作業をおこなっている。2.肝細胞感染ステージの原虫精製法を確立し、このステージのEST解析をおこなった。現在肝細胞感染30時間後の原虫の解析をおこなっている。今後さらに感染後の時間の異なる肝内型原虫を精製し、ESTの解析をおこなう。時間軸での遺伝子発現の変化を解析しその機能を知る手がかりとするとともに、肝臓感染維持機構の全体像を明らかにしたい。3.スポロゾイトEST解析データをもとに肝臓感染後にはじめて翻訳される2種類の遺伝子を同定した。免疫電顕法により感染細胞内での局在を調べたところ両者とも、原虫が感染肝細胞内に形成する寄生胞に局在することが明らかになった。これらの遺伝子をノックアウトし、原虫の肝臓への感染性を解析したとろ、約1万分の1まで感染性が低下した。従ってこれらの遺伝子が肝細胞内での感染維持に重要であることが分かった。現在、同様の手法を用い肝細胞感染に関わる新たな遺伝子を探索中である。4.上に述べた遺伝子の制御に関与する翻訳制御エレメント配列はmRNAの非翻訳領域に存在している可能性が高い。翻訳制御機構を解明する目的で、非翻訳領域を改変した原虫を複数作製した。これらの原虫を用い現在シス配列同定を試みている。

In this study, the molecular basis of parasite in liver cells of protozoa was studied. The purpose, expression and function of protozoa were analyzed. This year's results are as follows: 1. A large number of analyses of EST in the middle intestine and salivary glands The number of resolved ESTs is 1-2 million. The analysis data will be publicly disclosed in the future. This is the first time I've ever seen you. 2. Establishment of protozoa purification method for hepatocyte infection, EST analysis of protozoa Now hepatocyte infection after 30 hours of protozoan analysis. In the future, the time after infection will be different, and intrahepatic protozoa will be refined and ESTs will be analyzed. Timeline of gene expression and function analysis 3. The analysis of EST in the liver infection is based on the identification of two kinds of genes. The immune system is responsible for the development of parasitic cells in infected liver cells. The infectivity of protozoa in liver tissue was analyzed and about 10,000 of them were infected. It is important to maintain infection in hepatocytes. Now, the same method is used to explore the relationship between liver cell infection and new genes. 4. There is a high probability that the gene expression system described above exists in the non-translational domain of mRNA. The purpose of the control mechanism is clear, and the control mechanism in the non-control field is complex. The first time I saw him, I saw him.

项目成果

Tomoko Ishino, Kazuhiko Yano, Yasuo Chinzei, Masao Yuda: "Cell passage activity is required for the malarial parasite to cross the liver sinusoidal cell layer"PLoS Biology. 2. 77-84 (2004)

Tomoko Ishino、Kazuhiko Yano、Yasuo Chinzei、Masao Yuda：“疟疾寄生虫穿过肝窦细胞层需要细胞传代活性”《PLoS Biology》。