Igf2LOIを示すクローン化マウス肝癌細胞におけるIgf2LOIの機序

克隆小鼠肝癌细胞中 Igf2LOI 的机制

• 批准号: 15023204
• 负责人: 小川 勝洋
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Asahikawa Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15023204/
• 关键词: マウス肝癌細胞; Igf2; imprinting; LOI; H19; DMR; CTCF; Igf2DMR1

Igf2は父親由来のアレルからのみ発現するimprinting遺伝子であるが、がん細胞ではしばしば両親のアレルから発現するloss of imprinting (LOI)が観察される。正常細胞でのIgf2 imprintingには、H19上流、Igf2上流、Kvlqt1 intron内のdifferentially-methylated region (DMR)などが関係するとされている。さらに、多機能核内蛋白であるCTCFが、母親由来の非メチル化H19DMRに結合することがIgf2 imprintingに重要であることが報告されている。我々はマウス肝がんから個々の細胞がほぼ全てIgf2 LOIを示すクローンを作製し、H19DMR, Igf2DMR1,KvDMR1のアレル特異的メチル化を解析し、さらにCTCFの発現と変異を検討した。その結果、いずれのDMRにおいても正常のメチル化状態は維持されており、またCTCFの発現や遺伝子構造には異常が見られなかった。したがって、がん細胞におけるIgf2 LOIは上記のDMRのメチル化の異常やCTCFの異常では説明できないことが明らかになった。Igf2 LOIのメカニズムは依然として不明であるが、H19とIgf2遺伝子の間には種間保存されている機能が不明の領域が存在することやIgf2DMR1領域からantisense RNAが転写されていることが報告されており、これらの異常とLOIとの関係が今後の課題である。

Igf2 is the parent of the loss of imprinting (LOI). Igf2 imprinting in normal cells is related to H19 up-stream, Igf2 up-stream, and differentially methylated region (DMR) in Kvlqt1 intron. In addition, multifunctional nuclear proteins such as CTCF and H19DMR are important for Igf2 imprinting. We are now discussing the differences in the development of CTCF by analyzing the differences in the development of CTCF among all Igf2 LOI control systems, H19DMR, Igf2 DMR 1, and KvDMR1. As a result, the DMR is in a normal state and the CTCF is in an abnormal state. Ig f 2 LOI is abnormal in DMR and CTCF. Igf2 LOI is still unknown, H19 is still unknown, function is unknown, domain exists, Igf2 DMR1 domain is unknown, antisense RNA is still unknown, report is unknown, and LOI is still unknown.

项目成果

Ogawa, K., Yoshie, M., Tamakawa, S., Tokusashi, Y., Yamamoto, M., Yaginuma, Y.: "Possible role of the microenvironment created by neoplastic hepatocytes during hepatic carcinogenesis"Appl.Genom.Proteom.. 2. 135-143 (2003)

Okawa, K.、Yoshie, M.、Tamakawa, S.、Tokusashi, Y.、Yamamoto, M.、Yaginuma, Y.：“肝癌发生过程中肿瘤性肝细胞产生的微环境的可能作用”Appl.Genom.Proteom。

Ishizaki, T., Yoshie, M., Yaginuma, Y., Tanaka, T., Ogawa, K.: "Loss of Igf2 imprinting in monoclonal mouse hepatic tumor cells is not associated with abnormal methylation patterns for the H19, Igf2, and Kvlqt1 differentially methylated regions."J.Biol.Ch

Ishizaki, T.、Yoshie, M.、Yaginuma, Y.、Tanaka, T.、Okawa, K.：“单克隆小鼠肝肿瘤细胞中 Igf2 印记的丢失与 H19、Igf2 和 H19 的异常甲基化模式无关。

Gotoh, J., Obata, M., Yoshie, M., Kasai, S., Ogawa, K.: "Cyglin D1 over-expression correlates with b-catenin activation, but not with H-ras mutatons, and phosphorylation of Akt, GSK3b and ERK 1/2 in mouse hepatic carcinogenesis."Carcinogenesis. 24. 435-44

Gotoh, J.、Obata, M.、Yoshie, M.、Kasai, S.、Okawa, K.：“Cyglin D1 过表达与 b-连环蛋白激活相关，但与 H-ras 突变和 Akt 磷酸化无关