RhoファミリーGタンパク質による細胞分裂制御ならびに初期発生制御

Rho 家族 G 蛋白控制细胞分裂和早期发育

• 批准号: 15024213
• 负责人: 馬渕 一誠
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15024213/
• 关键词: 細胞分裂; 初期発生; Gタンパク質; Rho; アクチン; アクチン調節タンパク質; 分裂酵母; アフリカツメガエル

1)分裂酵母Rho4と上流因子の解析 分裂酵母rho3、rho4、rho5遺伝子をクローニングし、Rho4の解析を行った。rho4遺伝子破壊によりF-アクチンバッチの局在性が失われ、細胞質微小管の配向性も乱れた。電子顕微鏡観察により二次隔壁と細胞壁が異常に厚くなっていた。活性化型変異Rho4の発現で細胞形状が異常になった。アクチンバッチが局在を失い、微小管の配向も異常だった。Rho4とチューブリンに遺伝学的相互作用が見られた。間期ではRho4は細胞の成長端に、分裂期では分裂位置に局在した。以上からRho4はアクチンバッチの局在と微小管の構築を制御し、隔壁と細胞壁形成を制御していることが分かった。Rho4はそのRhoGDIであるRdi1により局在が制御され、RhoGAPのうちRga9により活性が制御されていることが分かった。2)ウニ卵IQGAPの機能解析 ウニCdc42遺伝子をクローニングした。ウニCdc42はヒトCdc42とアミノ酸レベルで87%の同一性を示した。ウニCdc42をセファロースビーズに結合させ、卵抽出液に加えた。ところ、分子量180Kのタンパク質が結合した。部分アミノ酸配列から、この成分はIQGAPと同定した。またビーズを拙出液に加えることによりその表面でアクチン重合が起こった。卵抽出液からIQGAPを除くとアクチン重合は起こらなくなった。また分裂中にはIQGAPは分裂溝に局在した。3)IQGAPの初期発生における働き アフリカツメガエルXIQGAP1,XIQGAP2のアンチセンスオリゴを胚に注入し、胚を発生させた結果XIQGAP1,XIQGAP2ともに胚の細胞接着に関与していることが分かった。

1) The upstream factors of Rho4 in Saccharomyces cerevina と are analyzed to determine the 伝 progeny of rho3, rho4, and rho5 in saccharomyces cerevina を ロ ロ ニ グ グ グ and Rho4 are analyzed to determine the を line った. rho4 has 伝 subunit disruption 壊によ <s:1> F-ア <s:1> チ <s:1> バッチ バッチ <s:1> locality loss われ and cytoplasmic microtubule <s:1> coordination disorder れた. The electronic 顕 microscope 観 detected an abnormal に thickness of the と cell wall next to the によ <e:1> が. The activated variant Rho4 shows で abnormal cell shape が になった. Youdaoplaceholder0 チ チ バッチが バッチが the bureau is lost in を, and the microtubule direction is <s:1> abnormal だった. Rho4とチュ とチュ ブリ に に the interaction of 伝 studies が see られた. During the interphase で で Rho4 <e:1>, the growth end of the cell is に, and during the division phase で. The division site に is locally located in the <s:1> た. Above か ら Rho4 は ア ク チ ン バ ッ チ の bureau in tiny tube と の build を royal し, next door と cell wall formation を suppression し て い る こ と が points か っ た. Rho4 は そ の RhoGDI で あ る Rdi1 に よ り bureau in が suppression さ れ, RhoGAP の う ち Rga9 に よ り が active suppression さ れ て い る こ と が points か っ た. 2)ウニ egg IQGAP <s:1> function analysis ウニCdc42 remains 伝 offspring を ニ ロ ニ ニ グ グ た た. Youdaoplaceholder0 Cdc42とア ヒトCdc42とア ノ acid レベ で で87% <s:1> identity を shows た た. Youdaoplaceholder0 Cdc42をセファロ スビ スビ ズに ズに combined with させ and oocyte retrieval fluid に plus えた. Youdaoplaceholder0 た ろ ろ, molecular weight 180K タ タ パ パ, the molecular weight が is bound to た た. Some ア ノ ノ acids are combined with ノ ら, and the <s:1> <s:1> component ら IQGAPと is the same as た. ま た ビ ー ズ を compensated に of produced liquid and え る こ と に よ り そ の surface で ア ク チ ン overlap が up こ っ た. The oocyte aspiration fluid チ らIQGAPを is を when the くとア チ チ <s:1> overlaps. Youdaoplaceholder0 split に また IQGAP に split groove に is located in た た. 3) IQGAP の 発 born early に お け る 働 き ア フ リ カ ツ メ ガ エ ル XIQGAP1, XIQGAP2 の ア ン チ セ ン ス オ リ ゴ を embryo に injection し, embryo を 発 raw さ せ XIQGAP1 た results, XIQGAP2 と も の に embryo cells then に masato and し て い る こ と が points か っ た.

项目成果

Kentaro Nakano: "The small GTPase Rho4 is involved in controlling cell morphology and septation in fission yeast."Genes to Cells. 8. 357-370 (2003)

Kentaro Nakano：“小型 GTP 酶 Rho4 参与控制裂殖酵母的细胞形态和分隔。”《基因到细胞》。

山城佐和子: "タンパク質がわかる"羊土社. 132 (2003)

山城佐和子：“了解蛋白质”Yodosha 132 (2003)。

Sawako Yamashiro: "Localization of two IQGAPs in cultured cells and early embryos of Xenopus laevis"Cell Motility and the Cytoskeleton. 55. 36-50 (2003)

Sawako Yamashiro：“非洲爪蟾培养细胞和早期胚胎中两个 IQGAP 的定位”细胞运动和细胞骨架。

馬渕 一誠: "細胞が分裂する時、収縮環はどのようにして形成されるか"学術月報. 56. 1243-1252 (2003)

Issei Mabuchi：“细胞分裂时收缩环是如何形成的？” 56. 1243-1252 (2003)

Yukako Nishimura: "An IQGAP-like protein in involved in actin assmbly together with Cdc42 in the sea urchin egg."Cell Motility and the Cytoskeleton. 56. 207-218 (2003)

Yukako Nishimura：“一种 IQGAP 样蛋白与海胆卵中的 Cdc42 一起参与肌动蛋白组装。”细胞运动和细胞骨架。