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テロメラーゼ活性を標的とした新規ウイルス療法の開発と化学療法との相互作用の解明

开发针对端粒酶活性的新型病毒疗法并阐明与化疗的相互作用

基本信息

批准号：
15025250
负责人：
藤原俊義
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15025250/
关键词：
テロメラーゼアデノウイルス hTERT ウイルス療法遺伝子治療

项目摘要

染色体DNA末端の短い塩基配列の繰り返しで構成されるテロメア長を保つ作用を持つ酵素テロメラーゼは、きわめて多くの癌細胞でその活性の上昇が知られている。構成分子hTERTの発現とテロメラーゼ活性が相関することが明らかになっており、多くの癌細胞ではhTERTプロモーターのスイッチがオンになり、その下流に組込まれた遺伝子が発現すると考えられる。アデノウイルスの増殖に必要なE1A遺伝子とE1B遺伝子をIRES配列で結合した発現カセットをhTERTプロモーターにより選択的に発現するTumor-specific Replication-competent Adenovirus(TRAD)を作成した。各種ヒト癌細胞においてテロメラーゼ活性は陽性であり、一方、線維芽細胞などの正常細胞では陰性であった。実際に、ヒト大腸癌細胞SW620およびヒト肺癌細胞H1299にTRADを感染させると、mRNAレベルおよび蛋白質レベルで選択的E1発現が認められた。それに一致して、TRAD感染後3日までに各種癌細胞においては10^5-10^8倍のウイルス複製増殖が認められたが、正常細胞では100-1000倍に抑えられていた。癌細胞では1 multiplicity of infection(MOI)のTRAD感染で、3日以内にcytopathic effect(CPE)が誘導され完全な細胞死が観察されたが、正常細胞ではTRAD感染後7日目でも細胞数の減少はみられなかった。ヌードマウス背部皮下に移植したH1299ヒト肺癌腫瘍にTRADを局所投与したところ、有意な増殖抑制が認められた。今後、TRADの生体内分布、免疫反応、各種抗癌剤との併用効果とその作用機序などを検討していく。

The short nucleotide sequences at the ends of chromosome DNA are composed of enzymes that maintain their activity in cancer cells. The expression and activity of the constituent molecules hTERT are correlated with the expression and activity of many cancer cells. E1A and E1B genes are necessary for the development of Tumor-specific Replication-competent Adenovirus(TRAD). All kinds of cancer cells are positive, one side, one side, normal cells are negative. In fact, the expression of TRAD in colorectal cancer cell SW620 and lung cancer cell H1299 was detected by mRNA and protein expression. 3 days after TRAD infection, all kinds of cancer cells were inhibited by 10^5-10^8 times and normal cells by 100-1000 times. Cancer cells were infected with TRAD by 1 multiplicity of infection(MOI), cytopathic effect(CPE) was induced within 3 days, complete cell death was observed, and normal cells were infected with TRAD by 7 days. H1299 is a new type of lung cancer. In the future, the distribution of TRAD in vivo, immune response, the effect of various anticancer agents and the mechanism of action will be discussed.