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胞子形成時にシンタキシンの劇的な細胞内移動を引き起こさせる分子機構の解明

阐明孢子形成过程中突触融合蛋白在细胞内剧烈运动的分子机制

基本信息

批准号：
15032251
负责人：
中村太郎
金额：
$ 2.82万
依托单位：
Osaka City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

分裂酵母のシンタキシンPsy1は栄養増殖には細胞膜に局在するが、胞子形成時になると、将来胞子の細胞膜となる前胞子膜に劇的に局在変化する。本研究はこの局在変化の分子機構を明らかにすることを目的とする。Psy1の局在変化の分子メカニズムを調べることは単に1タンパク質の局在変化ではなく、シンタキシンはターゲット膜を規定するタンパク質なので、膜小胞輸送の方向を変化されるメカニズムとしてもとらえることができる。Psy1が細胞内に取り込まれるのはエンドサイトーシスの系による可能性が高いと考えられるので、エンドサイトーシス追跡蛍光試薬FM4-64とGFP-Psy1の動きをタイムラプス観察したところ、両者の局在は一致した。また、胞子形成欠損株の中でPsy1の局在変化がみられないものをスクリーニングしたところ、1型ミオシンMyo1の欠損株が、目的の形質を示すことがわかった。また、栄養増殖時に胞子形成特異的転写因子Mei4を強制発現させると、Psy1の局在変化は誘導できることが知られているが、Myo1とSec9(PSy1とともにt-SNARE複合体を構成)を同時に強制発現しても栄養増殖においてもPsy1の局在変化をおこすことができた。sec9^+の発現誘導は一部Mei4に依存しているので、Myo1とSec9がPsy1の局在変化を制御する重要な因子であることがわかった。また、Myo1欠損株ではエンドサイトーシスが欠損していた。以上のことから、Psy1はエンドサイトーシスの系を用いて細胞内に取り込まれ、その過程には1型ミオシンが非常に重要な働きをしていることが明らかになった。

The cell membrane of the mitotic yeast Psy1 is in the process of cell culture, spore formation, and prespore membrane transformation. The purpose of this study is to clarify the molecular structure of the brain. Psy1's molecular structure is changed, and the direction of membrane cell transport is changed Psy1 is highly likely to be detected in the cellular environment, and GFP-Psy1 is highly likely to be detected in the cellular environment. In the case of the defective strain, the shape of the target is shown in the shape of the target. The expression of Mei4, Psy1 and Sec9 (PSy1 and t-SNARE complex) is a specific factor in the development of Psy1 and Psy1. Sec9^+ is an important factor in controlling the development of Mei4. Myo1 is in short supply. The above is a very important part of Psy1's system.