权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

分裂酵母における前胞子膜形成のリアルタイム観察とその制御機構の解析

裂殖酵母前孢子膜形成的实时观察及其调控机制分析

基本信息

批准号：
14760055
负责人：
中村太郎
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Osaka City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

我々は昨年度分裂酵母の前胞子膜形成を生細胞でリアルタイムに観察する系を観察したが、本年度はさらにこの系を発展させ、2つのタンパク質を同時に観察する系を導入した。具体的には前胞子膜はマーカータンパク質であるPsy1にGFPのバリアントであるYFPを融合させ、α-チューブリンタンパク質には同じくGFPのバリアントであるCFPを融合させた。これにより減数分裂の進行を詳細にモニターしながら前胞子膜形成を観察することが可能となった。経時的および統計的な観察の結果、以下のことが明らかになった。(1)前胞子膜形成の開始はこれまで第二減数分裂中期と思われていたが、それよりもやや早い前期もしくは前中期である。(2)膜の伸長は減数分裂の進行に伴い進んでいく。(3)第二減数分裂終了後もしばらく伸長は続く。(4)(3)の後完全に膜を包み込む。最終的に袋状の構造は球形に整えられていく。また、この観察系を用いてさまざまな胞子形成欠損株の前胞子膜形成を観察した。スピンドル極体に局在し、前胞子膜形成に関与するSpo15の変異株では減数分裂が正常に進行するにもかかわらず、前胞子膜形成はまったく起こらなかった。前胞子膜に局在し、前胞子膜の伸長および構造維持に必要なSpo3タンパク質の変異株では前胞子膜の形成は野生株と同様に開始するが、その後の伸長に異常があった。前胞子膜の伸長を測定したところ、第二減数分裂の終了後の伸長に特に欠損が見られた。前胞子膜に融合する膜小胞の輸送には栄養増殖時に働くSecタンパク質が必要であることが知られているが、そのタンパク質の1つSpo14の変異株では前胞子膜の形成が開始からずっと影響をうけ、伸長が遅いことがわかった。今回の解析により、これまで電子顕微鏡の観察結果を基本にした前胞子膜形成の機構に生細胞の経時的観察の結果を加え、新たな前胞子膜の形成機構を提唱した。以上の結果は現在論文にまとめ、投稿準備中である。

We have observed the development of the system for the formation of prespore membranes in yeast last year, and introduced the system for the development of prespore membranes in yeast this year. In vivo, the precursor membrane is fused with GFP and CFP. The process of meiosis is described in detail below. The results of the statistical survey of the time and time are as follows: (1)Prosporangium formation begins at the second metaphase. (2)Membrane elongation is accompanied by meiosis (3)After the end of the second meiosis, the elongation is reversed. (4)(3) After the complete film is included in the film. The final pocket structure is spherical. This observation system is used to detect the formation of pre-spore membrane in plants with poor spore formation. The meiosis of Spo15 is normal, and the formation of the prospore membrane is normal. Prospore membrane elongation and structural maintenance are necessary for the formation of prospore membrane in different plants and for the initiation of prospore membrane elongation in wild plants. The elongation of the prospore membrane was measured, and the elongation after the end of the second meiosis was particularly impaired. The transport of the pre-spore membrane fusion cell is necessary for the growth of the pre-spore membrane, and the formation of the pre-spore membrane is affected by the growth of the pre-spore membrane. The results of electron microscope observation of the present analysis show that the mechanism of prospore membrane formation is basic and the mechanism of prospore membrane formation is new. The above results are in preparation for submission.