マウス代償性肺成長におけるNotch/TTF-1シグナルの幹細胞ニッチへの関与

Notch/TTF-1信号参与小鼠代偿性肺生长干细胞生态位

• 批准号: 26861128
• 负责人: 高橋 祐介
• 金额: $ 2万
• 依托单位: Teikyo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26861128/
• 关键词: 肺再生; 肺切除術後; 幹細胞

平成26年度はマウス左肺全摘モデルを用いて残存右肺の組織学的解析で術後12時間にはすでに肺胞道の拡張が起こっており、Ki-67の免疫染色によって2型肺胞上皮細胞の増加が術後48時間から起こることが確認された。残存肺の過膨張がおそらく肺報道領域の拡張によって起こっていること、それが気管支肺胞導管移行領域の増殖トリガーとなる可能性が考えられた。術後12時間から48時間にかけての短時間に遺伝子発現の大きな変化が起こるためにはmiRNAによる調節が大きな役割を担っている可能性が高いと考えられたため、術後24時間の肺胞領域の細胞から抽出したmiRNAの発現をマイクロアレイによって解析した。平成27年度は初めにマイクロアレイの結果からターゲット遺伝子の絞り込みを行ったところ、当初標的と考えていたNotchシグナルを標的としないmmu-let-7f-5pの優位な上昇が認められ、HIF-1αおよびIkappaB、NF-kBがターゲット遺伝子として候補に挙がったため、これらに標的を変更して、その代償性肺成長への関連を検討することとした。これらの候補遺伝子の発現をmRNAおよびタンパクレベルで確認するため、ウエスタンブロットおよびPCRを行ったところ、HIF-1αは術後12時間でmRNAレベルの上昇、p-IkB-αは術後24時間でタンパク発現上昇が認められた。さらに免疫染色によって、術後24時間でのNFkBの発現上昇、Pro-SPCとの共発現を認めた。以上より、マウス左肺全摘モデルにおける代償性肺成長において術後早期のHIF-1αおよびそれに関連するNFkB系シグナルが代償性肺成長においても重要な役割を担う可能性が高いことが示唆された。今回、研究の一時中止となってしまったが、今後はHIF-1αおよびNFkBのsiRNA投与による代償性肺成長の阻害実験によって代償性肺成長への関与を証明したい。

Histological analysis of the remaining right lung in 2006 confirmed the increase of type 2 pulmonary epithelial cells by Ki-67 immunostaining 12 hours after surgery. The possibility of hyperinflation of the residual lung is examined. 12 hours after surgery, 48 hours after surgery, and a short time after surgery, the possibility of miRNA regulation was high. 24 hours after surgery, miRNA expression was detected in lung cells. In 2007, the results of HIF-1α and IkappaB and NF-kB were compared with those of HIF-1α and IkappaB. The expression of candidate gene mRNA was confirmed by PCR, HIF-1α mRNA increased at 12 hours after operation, and p-IkB-α mRNA increased at 24 hours after operation. The expression of NFkB increased 24 hours after operation, and the co-expression of Pro-SPC was detected. The NFkB system is associated with early postoperative HIF-1α in compensatory lung growth, which is highly likely to be associated with compensatory lung growth. The study was suspended for a while, but in the future, siRNA administration of HIF-1α and NFkB will be used to demonstrate the relationship between the inhibition of compensatory lung growth and the inhibition of compensatory lung growth.

项目成果

Qualitative Analysis of Preoperative High-Resolution Computed Tomography: Risk Factors for Pulmonary Complications following Major Lung Resection

术前高分辨率计算机断层扫描的定性分析：主要肺切除术后肺部并发症的危险因素

• 发表时间: 2015
• 期刊: Ann Thorac Surg
• 影响因子: 4.6
• 作者: Yusuke Takahashi;Megumi Matsuda,Shuri Aoki;Hitoshi Dejima;Takashi Nakayama;Noriyuki Matsutani;Masafumi Kawamura,
• 通讯作者: Masafumi Kawamura,