P. gingivalisのトランスポゾン挿入変異株による歯周病原因子の解析

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Porphyromonas gingivalisの歯周病原因子解析のための種々の変異株を得ることを目的として、接合伝達法によるトランスポゾンTn4351^*Ω4のランダムインサーションを行った。トランスポゾンを含む大腸菌HB101/R751::TN4351^*Ω4とP. gingivalis ATCC33277株の間で接合伝達を行い、トランスポゾン上のエリスロマイシン耐性遺伝子を用いたスクリーニングの結果、約400株のエリスロマイシン耐性株を得た。これらに対してヒツジ赤血球をもちいて血球凝集試験を行ったところ、明らかに血球凝集活性が低下した株が2株(HT43とHT45)がえられ、サザンブロッティングで挿入状態を解析すると、いずれの株においてもトランスポゾンがベクタープラスミドを含むcointegrateの状態で挿入されていた。またSDS-PAGE像では親株であるP. gingivalis ATCC33277に存在する分子量38kDaと23kDaのバンドがこれら二つの変異株には認められなかった。さらにHT43はStreptococcus mitiorやActinomyces viscocusに対する共凝集活性が対照として用いた親株よりも低下していた。これらの結果から、血球凝集活性や特定の細菌に対する共凝集に38kおよび23kタンパク質が関与している可能性が示唆された。このことは健常な細菌叢から歯周炎を惹起する病的な細菌叢への変化におけるP. gingivalisの定着メカニズムの解明につながるものと思われる。