発生・形態形成の個体レベルにおける分子生物学的研究

个体发育和形态发生水平的分子生物学研究

基本信息

批准号：
07NP0701
负责人：
竹市雅敏
金额：
--
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Creative Basic Research
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至 1997
项目状态：
已结题

项目摘要

1.3種類のカドヘリンの脳におけるカドヘリンの発現パターンを解析した結果、それぞれが異なる神経回路において発現することがわかった。さらに、カドヘリン結合タンパク質カテニンがシナプス結合に局在することが確定した。これらにより、カドヘリン/カテニンが神経間の結合と回路形成に関与する可能性はますます高まった。なお、カドヘリン11の遺伝子ノックアウトに成功したので、その解析により本問題を検証中である。また、ショウジョウバエの神経系カドヘリンを2種類クローニングし、その一つ、については、突然変異体を得てその形質を解析中である。2.FAK欠失個体の解析により、この分子がfocal adhesionのターンオーバーに関与することが示唆され、また、個体レベルではのう胚期に発生異常が観察された。3.Otx2欠失マウスの解析を深め、ロンボメア2より前方の頭部が欠損することが明らかになり、この領域形成にとって必須であることが証明された。4.HES1欠損マウスの解析し、Mash-1の発現が著しく増加し神経分化が正常より早く進行していることがわかった。その結果、頭部では神経管閉鎖不全、網膜では層構造の乱れがみらえた。これらの結果から、HES-1は分化の速度を抑制する役割を担っていることが明らかになった。5.δEF-1の欠失マウスの解析し、その欠失の領域に依存して、T細胞の分化、骨格系などに異常がおきることが判明した。6.jmj遺伝子欠損マウスの詳細な解析の結果、この遺伝子が巨核球細胞の発生に必須であることが示された。7.肢芽形成におけるBMP-2/BMP-4の機能を解明するため、そのドミナントネガティブ分子を強制発現させた。その結果、予定細胞死領域における細胞死が抑制された。また、肢芽間充織細胞の培養にBMPを与えるとアポトーシスが誘導された。すなわち、BMPはプログラム細胞死のメディエーターであることが明にされた。8.レセプターチロシンキナーゼSkyに関して、これが始原生殖細胞で発現し、同時にそのリガンドが生殖隆起の間質細胞で発現することにより、後者が前者の増殖を支えていることが示唆された。9.グリア細胞特異的遺伝子repoをニューロブラストにおいて強制発現させる実験を行い、グリアの細胞運命決定過程において重要な働きをしていることを明かにした。10.水晶体で発現されるL-mafの機能を検証するため、これを網膜細胞に導入するとクリスタリン遺伝子が活性化され、水晶体分化因子であることが証明された。

1。对1.3种钙粘蛋白类型的大脑中钙粘蛋白的表达模式的分析表明，每种钙粘蛋白都在不同的神经回路中表达。此外，已经证实了钙粘着蛋白结合蛋白链氨酸蛋白蛋白蛋白链蛋白本地化为突触结合。这些使钙粘着蛋白/catenin参与了神经元结合和电路形成的可能性。此外，由于钙粘蛋白11的基因敲除成功，因此通过分析验证了这个问题。此外，已经克隆了两种类型的果蝇神经系统钙粘蛋白，其中一种是突变体，正在分析其特征。 2。对FAK缺乏的个体的分析表明，该分子参与了局灶性粘附的营业额，并且在花萼胚胎阶段的个体水平上观察到发育异常。 3。加深对OTX2缺陷型小鼠的分析显示出rombomea 2前部的缺陷，表明它对于该区域的形成至关重要。 4。对HES1缺陷小鼠的分析表明，MASH-1表达显着增加，神经分化的进展快于正常情况。结果，在视网膜中观察到神经管闭合衰竭，并在视网膜中破坏了分层结构。这些结果表明，HES-1在抑制分化速率中起作用。 5。删除ΔEF-1的小鼠的分析表明，根据缺失区域，观察到T细胞分化和骨骼系统的异常。 6。对JMJ基因缺陷型小鼠的详细分析表明，该基因对于巨核细胞的发展至关重要。 7。为了阐明BMP-2/BMP-4在肢体芽形成中的功能，将主要的负分子被迫表达。结果，抑制了计划的细胞死亡区域的细胞死亡。此外，当将BMP放在肢体间充质细胞的培养物中时，诱导了凋亡。也就是说，BMP是程序性细胞死亡的调解人。 8。关于受体酪氨酸激酶的天空，它是在原始生殖细胞中表达的，同时在生殖基质细胞中表达其配体，这表明后者支持前者的增殖。 9。我们进行了一项实验，其中被迫在神经细胞中表达神经胶质细胞特异性基因回购，表明它在确定神经胶质细胞命运的过程中起着重要作用。 10。为了验证在镜头中表达的L-MAF的功能，当将其引入视网膜细胞时，将结晶蛋白基因激活，并被证明是晶状体分化因子。