Identification of GPCR binding proteins by using a novel anti-FLAG antibody and magnetic nanobeads

使用新型抗 FLAG 抗体和磁性纳米珠鉴定 GPCR 结合蛋白

• 批准号: 23659157
• 负责人: YOKOMIZO Takehiko
• 金额: $ 2.41万
• 依托单位: Juntendo University (2012)Kyushu University (2011)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23659157/
• 关键词: GPCR; 免疫沈降; 結合タンパク質

I established a novel anti-FLAG monoclonal antibody (2H8) with high-affinify and a low background. Combination of 2H8 antibody with a magnetic nanobeads enabled us to immunoprecipitate FLAG-tagged G-protein coupled receptors (GPCRs). Immunoprecipitated GPCRs were detectable by silver staining after separation by SDS-Page. I am analyzing some putative GPCR-binding proteins isolated by this novel immunoprecipitation techniques.

建立了一株高亲和力、低背景的抗FLAG单克隆抗体（2 H8）。2 H8抗体与磁性纳米珠的组合使我们能够免疫沉淀FLAG标记的G蛋白偶联受体（GPCR）。免疫沉淀的GPCR在SDS-Page分离后通过银染检测。我正在分析一些假定的GPCR结合蛋白分离这种新的免疫沉淀技术。

项目成果

「最新生理活性脂質研究-実験手法、基礎的知識とその応用-」遺伝子医学MOOK 24号

《最新生物活性脂质研究-实验方法、基础知识及其应用》遗传医学MOOK第24期

• 发表时间: 2013
• 作者: Xu M;Sulkowski ZL;Koibuchi N;Sajdel-Sulkowska EM;馬嶋正隆
• 通讯作者: 馬嶋正隆

新規 FLAG 抗体 2H8 の紹介

新型FLAG抗体2​​H8的介绍

What is the natural ligand of GPR55?

GPR55 的天然配体是什么？

• DOI: 10.1093/jb/mvr022
• 发表时间: 2011
• 期刊: J.Biochem.(Tokyo)
• 作者: Okuno T;Yokomizo T
• 通讯作者: Yokomizo T

Improved immunoprecipitation method for epitope-tagged GPCRs

表位标记 GPCR 的改进免疫沉淀方法

• 发表时间: 2011
• 作者: Morisaki Y;Sasaki F;Aratake Y;Okuno T;Saeki K;Yokomizo T
• 通讯作者: Yokomizo T

生化学実践問題基礎と臨床をつなぐ420題

420 个连接基础知识和临床实践的生物化学实用问题

• 发表时间: 2011
• 作者: Kurotaki D;Ichino M;Nishiyama A;Sato G;Yamamoto M;Ozato K;Tamura T;横溝岳彦(訳)
• 通讯作者: 横溝岳彦(訳)