遺伝性メトヘモグロビン血症の赤血球型と知能障害型の病態に関する研究

遗传性高铁血红蛋白血症红细胞类型与智力障碍类型病理研究

• 批准号: 61219019
• 负责人: 竹下 正純
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: 大分医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Special Project Research
• 财政年份: 1985
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1985 至 1986
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61219019/
• 关键词: 遺伝性メトヘモグロビン血症; NADH-チトクロム【b_5】還元酵素; 全翻訳配列; アミノ酸配列; 赤血球型と知能障害型; 極長鎖脂肪酸; 脂肪酸伸長反応; リグノセリン酸水酸化反応

遺伝性メトヘモグロビン血症が赤血球型(タイプ【I】)、知能障害型(タイプ【II】)の多型を示す遺伝的要因、および脳障害の機構を分子レベルで明らかにするために、遺伝子解析および脳脂質代謝機構の解析を行った。1.ファージλgt11で構成したヒト肝cDNAライブラリーから、NADH-チトクロム【b_5】還元酵素をコードするcDNAをクローン化し、ヒト赤血球の同酵素の抗ウサギ抗体でスクリーニングを行う方法で、同酵素の大部分の翻訳配列を含むcDNAを分離した。更にヒト胎盤ライブラリーから、5′末端部分をカバーする配列を含むcDNAクローンを分離した。これらの塩基配列を解析して、ヒト赤血球チトクロム【b_5】還元酵素の全翻訳配列および、ヒト肝における同酵素の膜結合部と考えられる19アミノ酸に相当する配列を含むcDNAの塩基配列を決定した。このcDNAの塩基配列から得られたアミノ酸配列は、赤血球の同酵素の全アミノ酸配列と完全に一致した。以上の結果から、ヒト赤血球および肝の酵素は同じ遺伝子によってコードされていると考えざるをえない。従って、本症の赤血球型は、本酵素のプロセシング過程の障害、または遺伝子の変異により不安定な酵素ができたためと考えられる。他方、【II】型は本酵素遺伝子の変異によって、赤血球型、体細胞型両酵素の活性が欠損したものと考えることができる。2.遺伝性メトヘモグロビン血症の脳障害に関連して、ミエリン形成にかかわる極長鎖飽和および不飽和脂肪酸の脳における伸長反応を検討し、アラキジン酸(20:0)から22:0,24:0に至る脂肪酸伸長反応に、2つの平行する経路があること、更に20:4から24:0の経路も2つあることを明らかにした。また、ミエリンを構成する極長鎖ヒドロキシ脂肪酸の形成をリグノセリン酸水酸化反応で検討し、ミクロソームのチトクロム【b_5】還元酵素系の関与を示唆する結果を得た。

The main causes, molecular mechanisms, genetic analysis, and lipid metabolism mechanisms of the polytypes of genetic disorders, including erythrocytic (I) and cognitive impairment (II), were analyzed. 1. The cDNA of NADH-reduced enzyme was transformed into cDNA, and the antibody against isoenzyme of erythrocytes was isolated from cDNA. In addition, the 5′-terminal part of the placenta was isolated from the cDNA library. The nucleotide sequence of the enzyme was analyzed and determined by cDNA sequencing. The nucleotide sequence of the cDNA was identical to that of the erythrocytes. The above results show that red blood cells and liver enzymes are the same as those in the liver. This disease is caused by the breakdown of erythrocytes, the breakdown of enzymes, and the breakdown of unstable enzymes. The enzyme activity of other,[II]-type and somatic cell types is deficient. 2. The relationship between the formation of fatty acids and the damage of fatty acids is discussed. Fatty acids (20:0) range from 22:0,24:0 to fatty acid elongation, 2: 0,20:4 to 24:0. The relationship between the formation of very long chain fatty acids and the formation of acid hydrolysis reactions was investigated.