Charakterisierung molekularer Veränderungen in der Entstehung des kolorektalen Karzinoms aus frühen Präneoplasien unter Berücksichtigung neuer Aspekte der malignen Transformation

Das Ziel des Gesamtprojektes ist die Charakterisierung molekularer Veränderungen in der Entstehung des kolorektalen Karzinoms aus frühen Präneoplasien unter Berücksichtigung neuer Aspekte der Schumen Transformation. Im ersten Abschnitt des Projektes wurden insgesamt über 300 kolorektale Karzinome gesammelt und diese ausführlich hinsichtlich ihrer pathologischen und molekularen Eigenschaften（Genomische Instabilität，Expression von Mismatch-Repairgenen bzw. Ploidiegrad）untersucht.随后，通过随机引物PCR方法对正常大肠粘膜上皮细胞和正常大肠粘膜上皮细胞的mRNA进行基因筛选。因此，在与KRK基因无关的致癌基因的共同作用中，最重要的是CENP-E和蛋白酪氨酸磷酸酶g（PTPG），以及两个基因，它们都是与KRK基因相关的致癌基因，而不是硫氧还蛋白还原酶（TR，Schlüsselenzyme des Redoxleichgewichts）和基质细胞衍生因子1（SDF 1）的克隆和测序。TR是通过我们最初的强化治疗而产生的，PTPG可以更好地抑制肿瘤。这是一个新的工作时期的核心工作。“用激光显微镜筛选恶性肿瘤的差异基因表达”（LMGE）。基因工程是人类基因工程的一个重要组成部分--通过转化人的大肠癌和大肠癌细胞来表达功能基因（PTPG，CENP-E，SDF 1）。第二个问题是通过识别与基因异常相关的致病基因，但也需要LMGE的帮助。

Das Ziel des Gesamtprojektes ist die Charakterisierung molekularer Veränderungen in der Entstehung des kolorektalen Karzinoms aus frühen Präneoplasien unter Berücksichtigung neuer Aspekte der malignen Transformation. Im ersten Abschnitt des Projektes wurden insgesamt über 300 kolorektale Karzinome gesammelt und diese ausführlich hinsichtlich ihrer pathologischen und molekularen Eigenschaften (Genomische Instabilität, Expression von Mismatch-Repairgenen bzw. Ploidiegrad) untersucht. Nach Isolation von mRNA aus Epithelzellen von Kolonkarzinomen und dazu korrespondierender normaler Kolonmukosa wurde ein Genscreening mittels RNA arbitrarily primed PCR durchgeführt. Hierbei wurden sowohl zwei bisher im Zusammenhang mit der Karzinogenese des KRK nicht bekannte Gene, das Zentromerprotein CENP-E und die Protein-Tyrosin Phosphatase g (PTPG), als auch zwei Gene, für die bereits ein Zusammenhang mit dem KRK beschrieben ist, nämlich die Thioredoxin-Reduktase (TR, Schlüsselenzyme des Redoxgleichgewichts) und der "Stromal cell-derived factor 1" (SDF1) kloniert und sequenziert. Die TR wurde durch uns erstmalig intensiv auf Gewebeebene, die PTPG hinsichtlich ihrer möglichen Bedeutung als Tumorsuppressorgen untersucht. Das Kernstück der bisherigen Arbeitsperiode war die Etablierung eines neuen Verfahrens. "Screening der differentiellen Genexpression aus wenigen Darmkrypten nach Laser-gesteuerter Mikrodissektion" (LMGE). Geplant ist im folgenden Abschnitt des Gesamtprojektes - wie im Erstantrag ausgeführt - die funktionelle Überprüfung dieser Gene (PTPG, CENP-E, SDF1) durch Transformation von humanen Kolonadenom- und Kolonkarzinomzellinien sowie die Expressionsüberprüfung dieser Gene in frühen Neoplasien des Kolons. Ein zweiter Teil soll sich mit der Identifikation der Isolierung von pathogenetisch relevanten Genen aus aberranten Krypten, aber auch niedriggradigen Adenomdysplasien mittels LMGE beschäftigen.