Immunchemische Charakterisierung von refraktären organischen Säuren aus Gewässern
水中难降解有机酸的免疫化学表征
基本信息
- 批准号:5172606
- 负责人:
- 金额:--
- 依托单位:
- 依托单位国家:德国
- 项目类别:Priority Programmes
- 财政年份:1994
- 资助国家:德国
- 起止时间:1993-12-31 至 2000-12-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Die immunchemische Charakterisierung der ROS mit Hilfe des "Serologischen Fingerprints" ermöglicht es, strukturelle Ähnlichkeiten und eventuelle Verwandtschaften von ROS aufzuzeigen. Hierbei sind folgende Teilaufgaben zu lösen: (1) Produktion und Charakterisierung von Antikörpern gegen ROS. (2) Auftrennung von ROS in ihre Fraktionen. (3) Immunchemische Reaktion mit den Teilfraktionen zur Generierung von ROS-spezifischen Mustern.Bisher wurden zwei Antiseren gegen ROS (Ho13 Original und BS1 FA) genutzt. Um weitere Antiseren für den "Serologischen Fingerprint" einsetzen zu können, werden zur Zeit Kaninchen mit vier weiteren ROS immunisiert (gegen Ho13 FA, FG1, FA, BS1 orig. und FG1 orig.). Mit Präzipitationstest und Dot-Blot-Test wird die Reaktivität und Selektivität dieser neuen Seren nachgewiesen, die anschließend für die immunchemische Analyse herangezogen werden sollen. Nach Auftrennung von ROS durch Elektrophorese oder isoelektrische Fokussierung kann durch Bindung der Antikörper an die ROS-Fraktionen ein typisches Bandenmuster erzeugt werden ("Serologischer Fingerprint"). Unbekannte ROS werden nach der Reaktion mit verschiedenen Antikörpern Verwandtschaftsklassen (Serotypen) zugeordnet.Die Kombination von ROS-Auftrennung mit der immunchemischen Reaktion wurde während dieser Projektphase in verschiedenen Varianten getestet. Als erfolgversprechend erweist sich das Immunblotting nach Vertikalelektrophorese und IEF, sowie der Gel Shift Assay, bei dem die Immunreaktion vor der elektrophoretischen Auftrennung stattfindet.Um Struktur- und Bindungseigenschaften der ROS analysieren zu können, werden bei allen Untersuchungen begleitend synthetische ROS-Modell-Substanzen der AG Knöchel (Hamburg) miteinbezogen.Die chemische Zusammensetzung von ROS ist ein weiteres Unterscheidungskriterium. Die AG Schulten (Rostock) ergänzt die Untersuchungen in diesem Zusammenhang durch den Nachweis verschiedener Verbindungsklassen in den elektrophoretisch aufgetrennten Antikörpern, ROS und Antikörper-ROS-Komplexen mit Hilfe der pyrolytischen Analyse und Massenspektroskopie.
ROS的免疫化学特性与血清指纹图谱的结合可以使ROS的免疫功能增强。这是一个值得关注的问题:(1)ROS的产生和特性。(2)在他们的行为中增加ROS。(3)免疫化学反应采用放射免疫法检测ROS特异性,Bisher检测了两种抗ROS抗体(Ho 13 Original和BS 1 FA)。Um weitere Antiseren für den“Serologischen Fingerprint”einsetzen zu können,韦尔登zur Zeit Kaninchen mit维耶weiteren ROS immersiert(gegen Ho13 FA,FG 1,FA,BS 1 orig. und FG 1 orig.). Mit Präzipitationstest和Dot-Blot-Test wird die Reaktivität und Selektivität dieser neuen Seren nachgewiesen,die anschließend für die immunchemische Analyse herangezogen韦尔登sollen.在通过Elektrophorese或isoelektrische Fokussierung从ROS中提取后,可以通过Antikörper的绑定将ROS-Fraktionen一种典型的Bandenmuster erzeugt韦尔登(“血清学指纹”)。未被证实的ROS韦尔登与抗血清型抗体反应。ROS与免疫化学反应的结合在抗血清型抗体中进行了检测。本研究采用凝胶迁移试验(Gel Shift Assay)进行垂直电泳和IEF的免疫印迹,并通过对活性氧的结构和结合进行分析,从而合成了AG Knöchel(Hamburg)的ROS-模型-物质。活性氧的化学合成是一项重要的非标准实验。AG Schulten(罗斯托克)通过Nachweis versedener Verbindungsklassen在electrophoretisch aufgetrennten Antikörpern、ROS和Antikörper-ROS-Komplexen mit Hilfe der Pyrolytischen Analyse und Massenspektroskopie中进行了该领域的研究。
项目成果
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