Klonierung des renalen Dicarboxylat-Transportsystems und seine Bedeutung für die Chronizität renaler Erkrankungen

肾二羧酸转运系统的克隆及其对慢性肾病的意义

• 批准号: 5180684
• 负责人: Professor Dr. Gerhard Burckhardt
• 金额: --
• 依托单位: PortaCellTec Biosciences GmbH
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1993-12-31 至 2004-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5180684?language=en
• 关键词: Klonierung; des; renalen; Dicarboxylat; Transportsystems

Der basolaterale Dicarboxylattransporter versorgt proximale Tubuluszellen mit Energiesubstraten und regelt direkt oder indirekt (Kopplung an den PAH-Transporter) die Sekretion einer Vielzahl anionischer Xenobiotika. Mit Hilfe der Expressionsklonierung konnten wir einen Klon (fNaDC-3) aus einer Nieren-cDNABibliothek der Winter-Flunder isolieren, der strukturell für ein Protein aus 601 Aminosäuren mit mindestens 8 transmembranösen Domänen und funktionell für einen elektrogenen, Natrium-abhängigen Dicarboxylattransporter codiert. Hohe Affinität für Succinat, Hemmbarkeit durch 2,3-Dimethylsuccinat und cis-Aconitat, spezifische Substrate des basolateralen Dicarboxylattransporters sowie ein höherer Transport von Succinat und Citrat bei pH 7,5 als bei saurem pH, belegen, daß fNaDC-3 dem basolateralen Dicarboxylattransporter entspricht. Im Weiteren soll nach Injektion der cRNA in Xenopus laevis Oozyten, z.T durch Koinjektion des PAH-Transporters, der Transport anionischer Pharmaka, die Regulation des Dicarboxylattransporters sowie der Einfluß gerichteter Mutagenese analysiert werden. Durch Homologieklonierung soll der basolaterale Dicarboxylattransporter von Mensch und Kaninchen identifiziert werden. Mit Hilfe von in situ Hybridisierung und Antikörpermarkierung soll die Verteilung dieses Klons in Geweben von Flunder, Mensch und Kaninchen untersucht werden. Ebenso soll die Bedeutung dieses Transportsystems bei Nierenerkrankungen an humanen Nierenbiopsaten geklärt werden.

基底外侧二羧基转运蛋白与近端小管的能量吸收和直接或间接（与PAH转运蛋白的连接）连接是一种较强的阴离子异种生物。表达克隆的方法是通过一个Winter-Flunder isolieren的Nieren-cDNABibliothek上的Klon（fNaDC-3），构建一种蛋白质601 Aminosauuren，带有8个跨膜结构，功能是产生一种电，钠-abhängigen二羧基转运蛋白。Hohe Affinität für Succinat，Hemmbarkeit durch 2，3-Dimethylsuccinate und cis-succinitat，specifically Substrate des basolateralen Dicarboxylattransporters sowie ein höherer Transport von Succinat und Citrat bei pH 7，5 als bei saurem pH，belegen，davorfNaDC-3 dem basolateralen Dicarboxylattransporter entspricht.在非洲爪蟾（Xenopus laevis Oozyten）体内注射cRNA后，通过对多环芳烃转运体的共注射，对阴离子转运体药物的二羧酸转运体的调控进行了韦尔登致突变分析。通过韦尔登和卡宁肯的鉴定，发现了基底外侧二羧基转运蛋白的同源性。Mit Hilfe von in situ Hybridisierung und Antikörpermarkierung soll die Verteilung dieses Klons in Geweben von Flunder，Mensch und Kaninchen untersucht韦尔登。因此，这些交通系统是由一个韦尔登组成的。