受精のシグナル伝達におけるRho蛋白質の位置づけ

Rho蛋白在受精信号转导中的作用

• 批准号: 08878133
• 负责人: 横沢 英良
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08878133/
• 关键词: 受精; Rho蛋白質; チロシンリン酸化; チロシンキナーゼ

受精のシグナル伝達におけるRho蛋白質とチロシンリン酸化について解析し、以下の成果を得た。1.ユウレイボヤでは、受精の初期、精子添加後5分に、surface contractionと呼ばれる形態変化が観察される。卵内に前もってRho蛋白質を失活させるADPリボシルトランスフェラーゼC3を顕微注入すると、精子を添加しても上記の卵の形態変化は起こらず、また、受精も進行しないことが明らかになった。すなわち、Rho蛋白質が受精初期の機構に関与すると考えられる。2.受精初期の機構に関与するチロシンキナーゼを明らかにするために、ユウレイボヤ卵のsurface contractionに対する各種チロシンキナーゼインヒビターの阻害作用を調べた。その結果,erbstatin analogは阻害効果を示したが、その他のインヒビターはほとんど阻害しなかった。すなわち、erbstatin analog感受性チロシンキナーゼが受精初期の機構に関与することが明らかになった。3.ユウレイボヤの受精に伴う卵蛋白質のチロシンリン酸を、ホスホチロシンを認識するモノクローナル抗体PY20を用いたウェスタンブロット解析により調べた。その結果、surface contractionが起こる、精子添加後2〜5分の間に,分子量66kD、75kD、100kD、140kD、190kDの蛋白質がチロシンリン酸化され,その後,脱リン酸化されること、また、erbstatin analogが75kD蛋白質のチロシンリン酸化を阻害することが明らかになった。このチロシンリン酸化とRho蛋白質の関係を明らかにするために、チロシンリン酸化に対するADPリボシルトランスフェラーゼC3の効果を調べようとしたが、C3酵素を顕微注入できる卵の量の問題でまだ未解決である。

The results of fertilization test, Rho protein test, acidification test, analysis and analysis are as follows. 1. In the early stage of fertilization, 5 minutes after the addition of sperm, the morphology of the sperm was examined by surface contraction. In-egg precursors, Rho protein inactivation, ADP protein inactivation, sperm injection, fertilization and fertilization were performed. In the early stage of fertilisation, the organs of Rho protein were tested and tested. two。 In the early stage of fertilization, the organization and the pregnant women did not need to know that there was a significant difference between the two groups in the early stage of fertilisation. In the early stage of fertilization, the organs and their parents did not know how to treat the eggs in the early stage of fertilization. in the early stage of fertilization, all kinds of drugs were used to prevent the damage. The results showed that the erbstatin analog blocking results showed that the results were not correct, and the results showed that the results were not correct. In the early stage of fertilization, the mechanism and the erbstatin analog sensitivity test showed that the organ had a clear diagnosis of the disease. 3. The eggs were fertilised with egg whites, and the eggs were sour and sour. The antibody PY20 was detected in the egg whites. The results showed that the molecular weight of 66kD, 75kD, 100kD, 140kD and 190kD was measured 2-5 minutes after sperm addition, and the molecular weight of 66kD, 75kD, 100kD, 140kD, 190kD protein was acidified. After that, it was deacidified and erbstatin analog protein was acidified. The Rho protein was acidified, the ADP protein was acidified, the protein was acidified, the C3 protein was acidified, the C3 enzyme was microinjected into the egg count, and the problem was not solved.