Schnelle kinetische Untersuchung des molekularen Mechanismus von neuronalen Glutamat-Transportern

点击翻译按钮获取中文摘要

Glutamat-Transporter liefern einen wichtigen Beitrag zur Kontrolle der Glutamatkonzentration im synaptischen Spalt und sind für den Mechanismus der Signalübertragung an excitatorischen Synapsen von entscheidender Bedeutung. Es ist daher wichtig, Informationen über den molekularen Mechanismus des GlutamatTransportprozesses zu erhalten. Dieser Prozess kann mit Hilfe von schnellen, chemisch-kinetischen Methoden zu einer sub-ms Zeitauflösung untersucht werden. Diese Methoden erlauben es, schnelle Schritte im Transportzyklus zeitaufgelöst zu messen. Zum Erreichen einer derartig hohen Zeitauflösung wird Glutamat innerhalb von etwa 20 µs durch Photolyse einer photolabilen, inaktiven Vorstufe photochemisch erzeugt. Glutamat-induzierte Ladungsverschiebungen, die durch elektrogene Teilschritte im Transportzyklus hervorgerufen werden, sollen mit Hilfe der Patch-Clamp Methode gemessen werden. Ein ähnliches Verfahren wurde von uns erfolgreich benutzt, um Geschwindigkeitskonstanten von Konformationsänderungen in Neurotransmitter-Rezeptoren im sub-ms Zeitbereich zu untersuchen. Das Ziel dieses Forschungsvorhabens ist es, den molekularen Mechanismus von Glutamat-Transportern zu untersuchen.