Strukturelle und kinetische Charakterisierung von Intermediaten der Fehlfaltung und Aggregation von Proteinen

蛋白质错误折叠和聚集中间体的结构和动力学表征

• 批准号: 5456861
• 负责人: Professor Dr. Bernd Reif
• 金额: --
• 依托单位: Professur für Festkörper-NMR-Spektroskopie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Units
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2004-12-31 至 2009-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5456861?language=en
• 关键词: Strukturelle; und; kinetische; Charakterisierung; von

Die Bildung von Amyloidfibrillen ist ein hierarchischer Prozess von Fehlfaltungs- und Aggregationschritten. Sowohl die Struktur als auch die pathogene Wirkung der beteiligten Spezies sind im Detail unklar. Wir wollen deshalb Intermediate der Proteinfehlfaltung strukturell und kinetisch an zwei Modellproteinen, der SH3 Domäne der Phosphatidylinositol-3kinase und Barstar, mittels Flüssigkeitsund Festkörper-NMR, Röntgenkristallographie, Lichtstreuung und optisch-spektroskopischen Methoden untersuchen und klären, welche chemischen Gruppen primär an Protein-Protein Wechselwirkungen in bestimmten fehlgefalteten Zuständen beteiligt sind. Der Aggregationsprozess wird mit Lichtstreuung detektiert. Durch chemische Modifikation des Proteins und/oder bestimmte Lösungsbedingungen sollen Aggregationsintermediate kinetisch stabilisiert werden, um eine Strukturanalyse mit NMRSpektroskopie zu ermöglichen. Durch Synthese His-25-modifizierter bzw. selektiv fluorierter Proteine soll die Protein-Protein Kontaktfläche ermittelt werden. Die organische Synthese ermöglicht darüber hinaus eine gezielte Variation verschiedener funktioneller Gruppen innerhalb der Struktur. Ferner sollen Modellpeptide untersucht werden, deren Sequenz offenbar für die Fehlfaltung und Aggregation dieser Proteine entscheidend ist. Langfristig sollen diese Untersuchungen auf Aß -Amyloid und Prionproteine ausgeweitet werden.

淀粉样变性的培养是一种分级的消化和聚集过程。因此，结构也是一个不清楚的细节。我们将设计两种蛋白质模型的蛋白质结构和动力学中间体，磷脂酰肌醇-3激酶和Barstar的SH 3结构域，使用FlüssigkeitsundFestkörper-NMR，Röntgenkristallographie，Lichtstreuung和optisch-spektroskopischen方法进行研究和分类，并将化学组首先进行蛋白质-蛋白质微生物学的研究。聚合过程将带有光照检测。蛋白质的化学修饰和/或对中间聚集体的稳定性进行测定，用核磁共振光谱进行结构分析。多诺合成His-25-修饰剂bzw. selektiv fluorierter Proteine soll die Protein-Protein Kontaktfläche ermittelt韦尔登。Die organische Synthese ermöglicht darüber hinaus eine gezielte Variation verzedener funktioneller Gruppen innerhalb der Struktur.通过韦尔登的分离模型，确定了蛋白质的融合和聚集的顺序。Langfristig sollen diese Untersuchungen auf Aesthetic-Amyloid and Prion Proteine ausgeweitet韦尔登.