RNAのポリA鎖伸長を介した染色体分配制御ネットワーク

RNA PolyA 链延长介导的染色体分离控制网络

• 批准号: 18058005
• 负责人: 中西 友子
• 金额: $ 3.2万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18058005/
• 关键词: mGLD-2; ポリA鎖伸長; ノックアウトマウス; 卵子; 細胞質; mRNA; ポリAポリメラーゼ; 卵子成熟

個体の発生・分化は、遺伝子発現を時空間的に制御することで正常に進行する。なかでも生殖細胞の分化においては、体細胞と異なり転写レベルでの調節に加え、翻訳レベルでの調節が遺伝子発現に大きく寄与している。我々はこれまでに、線虫やカエルの卵子でmRNAポリA鎖を伸長させるポリAポリメラーゼ(PAP)GLD-2のマウスホモログ(mGLD-2)に着目し、Mgld-2が細胞質でのポリA鎖付加に必須なCPSF160およびCPEBと協調してCyclinB1やMos MrnaなどのポリA鎖を伸長させることで、卵成熟の進行に必須な細胞周期関連タンパク質の翻訳を活性化していることを明らかにしてきた。そこで本年度は、作製したmGLD-2ホモ欠損マウス卵子の表現型について詳細に解析を行った。内在性および外来性mRNAを指標にポリA鎖伸長活性を検討した結果、ホモ欠損卵子ではヘテロ欠損卵子と比較して活性が低いものの有意な差を認めることはできなかった。このことを反映するように、ヘキスト33342を利用した細胞分裂過程の染色体分配や、胚発生速度のタイムラプス観察においても、ホモおよびヘテロ欠損卵子との間で違いはなかった。これらのことはmGLD-2のポリA鎖付加活性を補完する酵素の存在を示しており、卵子における減数分裂の進行が、複数個のPAPによる細胞周期関連タンパク質の翻訳活性化を介した複雑なネットワークで制御されていることが明らかとなった。

个体发展和分化正常通过控制基因表达时空。特别是，在分化生殖细胞（与体细胞不同，在转录水平上的调节以及转化水平的调节）对基因表达有显着贡献。 We have previously focused on the mouse homolog (mGLD-2) of polyA polymerase (PAP) GLD-2, which extends mRNA polyA chains in eggs of nematodes and frogs, and have shown that Mgld-2 coordinates with CPSF160 and CPEB, which are essential for polyA chain addition in the cytoplasm, and activates the translation of cell cycle-related proteins essential for the progression of egg成熟。因此，今年我们对产生的MGLD-2均缺陷小鼠卵的表型进行了详细分析。当使用内源性和外源mRNA作为指标研究Polya链的扩展活性时，尽管它在同性卵中的活性较小，而不是在异性缺陷卵中，但没有发现显着差异。为了反映这一点，使用HOECHST 33342和延时观察胚胎发育速率，在细胞分裂过程中，同型缺陷卵在细胞分裂过程中没有差异。这些结果表明，存在补充MGLD-2的Polya链添加活性的酶，表明卵中的减数分裂进程是通过复杂网络通过多个PAP的细胞周期相关蛋白的转移激活来调节的。

项目成果

Disruption of mouse poly(A) polymerase mGLD-2 does not alter polvadenvlation status in oocytes and somatic cells.

破坏小鼠多聚腺苷酸聚合酶 mGLD-2 不会改变卵母细胞和体细胞的多腺苷酸化状态。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Biochem. Biophys. Res. Commun. 364
• 作者: Nakanishi. T.;et. al.
• 通讯作者: et. al.