Development of a new culture system for human coronaviruses using organoids

使用类器官开发人类冠状病毒新培养系统

• 批准号: 22K19431
• 负责人: 野田 岳志
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19431/
• 关键词: オルガノイド; コロナウイルス; インフルエンザウイルス; 風邪コロナウイルス

現在、ヒトの世界に存在するコロナウイルスは、わずか6種類のみである。βコロナウイルス属のHCoV-OC43とHCoV-HKU1、αコロナウイルス属のHCoV-229EとHCoV-NL63の4種類は、ヒトに軽度の風邪（季節性の風邪）を引き起こす。一方、新型コロナウイルス感染症の原因であるSARS-CoV-2と中東呼吸器症候群の原因であるMERS-CoVの2種類は、βコロナウイルス属に属し、ヒトに重篤な呼吸器疾患を引き起こす。風邪コロナウイルスの研究を行うためには、患者から風邪コロナウイルスを分離し効率よく増殖させる必要がある。これまで様々な培養細胞がウイルス分離に試されてきたが、風邪コロナウイルス（特にHCoV-NL63およびHCoV-HKU1）を効率よく分離培養できる細胞が存在しないという大きな問題があり、研究の進展を妨げている。そこで本研究では、これまでに確立したヒト鼻腔オルガノイド実験系を改変し、風邪コロナウイルスの新たな分離培養法を開発することを目的とした。本年度はこれまでに開発した3次元のヒト鼻腔オルガノイドの培養方法を改変し、2次元の鼻腔オルガノイドシートの作製方法を開発した。2次元平面培養したヒト鼻腔オルガノイドを用いて、HCoV-229E、HCoV-OC43を感染させたところ、両ウイルスともに増殖することを確認した。さらにHCoV-NL63およびHCoV-HKU1を感染させたところ、両ウイルスともに増殖することが確認された。また、近年ヒトで流行するH3N2インフルエンザウイルスはMDCK細胞で増殖しないことが知られているが、2次元鼻腔オルガノイドではウイルスが増殖することが確認された。

There are six kinds of food in the world. The four types of β-C, HCoV-OC43, HCoV-HKU1 and α-C, HCoV-229E and HCoV-NL63 are introduced into the atmosphere. The cause of SARS-CoV-2 and Middle East Respiratory Syndrome is a new type of respiratory disease. The cause of SARS-CoV-2 and Middle East Respiratory Syndrome is a new type of respiratory disease The study of happiness is necessary for patients to be separated from happiness. This is why we try to isolate cultured cells (especially HCoV-NL-63 and HCoV-HKU-1). This study aims to establish a new isolation culture method for the development of nasal cavity culture. This year, the development of three-dimensional nasal cavity culture method was improved, and the development of two-dimensional nasal cavity culture method was improved. 2-dimensional planar culture of HCoV-229E and HCoV-43 HCoV-NL63 and HCoV-HKU1 are sensitive and reliable. In recent years, the popularity of H3N2 has been confirmed by MDCK cell proliferation.

项目成果

Migration of Influenza Virus Nucleoprotein into the Nucleolus Is Essential for Ribonucleoprotein Complex Formation

• DOI: 10.1128/mbio.03315-21
• 发表时间: 2022-01-04
• 期刊: mBio
• 影响因子: 6.4
• 作者: Miyamoto S;Nakano M;Morikawa T;Hirabayashi A;Tamura R;Fujita-Fujiharu Y;Hirose N;Muramoto Y;Noda T
• 通讯作者: Noda T

Role of VP30 Phosphorylation in Ebola Virus Nucleocapsid Assembly and Transport

VP30 磷酸化在埃博拉病毒核衣壳组装和运输中的作用

• DOI: 10.1128/jvi.01083-22
• 发表时间: 2022
• 期刊: Journal of Virology
• 影响因子: 5.4
• 作者: Takamatsu Yuki;Yoshikawa Tomoki;Kurosu Takeshi;Fukushi Shuetsu;Nagata Noriyo;Shimojima Masayuki;Ebihara Hideki;Saijo Masayuki;Noda Takeshi
• 通讯作者: Noda Takeshi