着床前初期胚の個体形成能評価法の確立

点击翻译按钮获取中文摘要

クロマチンの緩さはES細胞の分化能の指標として知られている。そこで我々は、胚においてもクロマチンの緩さが個体発生能の高低に関わるのではないかと考えた。本研究では、ヒストンの動性からクロマチンの緩さを推定できるFRAP (+) 法を用いて、胚を生かしたまま個体発生能を評価する方法の確立を目指し研究を行ってきた。これまでに、BDF1雌マウスの卵子にICR雄マウスの精子が受精した胚についてFRAP解析を行ったところ、1細胞期、2細胞期共にクロマチンが最も締まったグループの胚盤胞発生率が最も低くなることが分かった。さらに、マウス系統による影響を検証するため、BDF1、B6N、ICR雌マウスの卵子と、B6N、ICR雄マウスの精子を組み合わせて体外受精を行い、計6種類の1細胞期胚の解析に着手した。その結果、BDF1またはB6N卵子に対して、ICR精子が受精した胚では、クロマチンが過剰に締まったグループの胚盤胞発生率が低くなる一方で、B6N精子が受精した胚では、クロマチンが過剰に緩んだグループの胚盤胞発生率が低くなった。さらにBDF1卵子由来の胚に限っては、精子の系統に関わらずクロマチンが過剰に緩んでも、締まっても胚盤胞発生率が低くなった。以上より、BDF1やB6Nなどの、遺伝的に均一なマウスの卵子由来の胚では、精子側のマウス系統によってピークが異なるものの、クロマチンが過剰に締まった、あるいは緩んだ胚の胚発生能が低下する可能性が示唆された。一方、ICR卵子由来の胚については、ICRまたはB6N精子のどちらが受精しても、クロマチンの緩さと胚盤胞発生率に相関が見られなかった。以上より、ICRのように個体ごとの遺伝的背景が異なるマウスについては、クロマチンの緩さと胚盤胞発生の間に相関が見られない可能性が考えられる。