カルシウムイオンによるホスホリラーゼキナーゼ活性の調節機構

钙离子对磷酸化酶激酶活性的调节机制

• 批准号: 60223020
• 负责人: 福井 俊郎
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Special Project Research
• 财政年份: 1985
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1985 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-60223020/
• 关键词: カルシウムイオン; ホスホリラーゼキナーゼ; 活性調節親和標識剤

ホスホリラーゼキナーゼはグリコーゲン代謝の調節において中心的位置を占める重要な酵素であり、リン酸化-脱リン酸化とカルシウムイオンによる2重の調節機構をもつ。特に筋肉酵素では、カルモジュリンが構成サブユニットの1つとして酵素を形成しているという特徴をもつ。私どもは先にヌクレオチド結合部位に対する新しい親和標識剤として、ウリジン二リン酸ピリドキサールを開発したので、本研究ではアデノシンを含む同様な試薬を合成し、それを用いてホスホリラーゼキナーゼを親和標識することにより、ホスホリラーゼキナーゼの活性調節機構を明らかにしようとした。先ず新しい親和標識剤としてアデノシン二リン酸ピリドキサールとアデノシン三リン酸ピリドキサールを合成した。リン酸基の数を変えることにより、塩基結合部位と反応性のリシン残基との距離により適合したものを見つけようとした。これら試薬をウサギ筋肉から精製したホスホリラーゼキナーゼに作用させたところ、二リン酸化合物ではピリドキサールリン酸自身と余り変らなかったが、三リン酸化合物では顕著な失活がみられた。しかも、その失活はカルシウムイオンによって著しく促進された。これまでに8-アザATP,ジアルデヒドATPなどによるホスホリラーゼキナーゼの修飾が試みられてきたが、それらの場合にはカルシウムイオンによる促進効自はみられず、今回私どもが得た結果と明らかに異っており、私どもが開発した試薬がカルシウムによる調節機構を研究するのに極めて適していることを示している。現在、どのサブユニットへ結合しているかを実験中で、今後、これをレポーターとしてカルシウムイオンの影響を調べると共に、カルシウムイオンによる活性調節が余りみられない肝臓のホスホリラーゼキナーゼとの比較研究を計画している。

ホ ス ホ リ ラ ー ゼ キ ナ ー ゼ は グ リ コ ー ゲ の ン metabolism regulating に お い を て center position of め る important な enzyme で あ り, リ ン acidification - off リ ン acidification と カ ル シ ウ ム イ オ ン に よ る 2 heavy の regulator を も つ. Trevor に brawn enzyme で は, カ ル モ ジ ュ リ ン が constitute サ ブ ユ ニ ッ ト の 1 つ と し て enzyme を form し て い る と い う, 徴 を も つ. Private ど も は に first ヌ ク レ オ チ ド combining site に す seaborne る new し い affinity logo tonic と し て, ウ リ ジ ン two リ ン acid ピ リ ド キ サ ー ル を open 発 し た の で, this study で は ア デ ノ シ ン を containing む with others try な 薬 を synthetic し, そ れ を with い て ホ ス ホ リ ラ ー ゼ キ ナ ー ゼ を affinity logo す る こ と に よ り, ホ ス ホ リ ラ ー ゼ キ ナ ー ゼ の Active regulatory mechanism を Ming ら に に ようと た た た. First new し ず い affinity logo tonic と し て ア デ ノ シ ン two リ ン acid ピ リ ド キ サ ー ル と ア デ ノ シ ン three リ ン acid ピ リ ド キ サ ー ル を synthetic し た. リ ン acid base number の を - え る こ と に よ り, salt based inverse parts と 応 の リ シ ン residues と の distance に よ り suitable し た も の を see つ け よ う と し た. Try こ れ ら 薬 を ウ サ ギ brawn か ら refined し た ホ ス ホ リ ラ ー ゼ キ ナ ー ゼ に role さ せ た と こ ろ, two リ ン acid compound で は ピ リ ド キ サ ー ル リ ン acid more than their own と り - ら な か っ た が, three リ ン acid compound で は 顕 the な inactivation が み ら れ た. <s:1> そ そ inactivation カ カ シウム シウム シウム <s:1> によって によって によって された く promoting された. こ れ ま で に 8 - ア ザ ATP, ジ ア ル デ ヒ ド ATP な ど に よ る ホ ス ホ リ ラ ー ゼ キ ナ ー ゼ の modified が try み ら れ て き た が, そ れ ら の occasions に は カ ル シ ウ ム イ オ ン に よ る promote unseen since は み ら れ ず, now back to the private ど も が have た results と Ming ら か に different っ て お り, private ど も が open 発 し た try 薬 が カ ル シ ウ ム に よ る Regulating mechanism を research す る の に extremely め て optimum し て い る こ と を shown し て い る. Now, ど の サ ブ ユ ニ ッ ト へ combining し て い る か を be 験 で, in the future, こ れ を レ ポ ー タ ー と し て カ ル シ ウ ム イ オ ン の influence を adjustable べ る と に, カ ル シ ウ ム イ オ ン に よ る activity regulating more than が り み ら れ な い routine liver の ホ ス ホ リ ラ ー ゼ キ ナ ー ゼ と の comparative study を project し て い る.

项目成果

化学と生物. 23-6. (1985)

化学与生物学。23-6。

Mem.Inst.Sci.Ind.Res.,Osaka Uriv.42. (1985)

内存研究所科学工业研究中心，大阪Uriv.42。

J.Biol Chem.260-11. (1985)

J.Biol Chem.260-11。