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アデノウイルス群の発がん遺伝子の多様性と他の遺伝子との協調性

腺病毒组致癌基因的多样性及其与其他基因的协同作用

基本信息

批准号：
61010099
负责人：
石橋正英
金额：
$ 10.94万
依托单位：
Aichi Cancer Center Research Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1986
资助国家：
日本
起止时间：
1986 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ヒトアデノウイルス12型E1A遺伝子によって転写が抑制されるラット細胞mRNAに対応するcDNAクローン1株を分離したが、これはこのウイルスによるトランスフォーメーションの初期過程を解析する上で画期的な一歩である。同12型E1A遺伝子上に種々の変異をもつDNA断片をラット3Y1細胞に導入して、E1Aとトランスフォーム能の詳細な検討をした。そして、アデノウイルス型間での類似性が低く、トランスフォーム能に直接関与しないとされていたN末端近辺領域も、実は、関与することを明らかとした。同12型のE1A遺伝子の導入をうけた3Y1細胞の軟寒天内コロニー形成効率がV-ab1遺伝子の共導入によって上昇することを見つけた。同12型E1A遺伝子はニワトリ細胞内でインターフェロンを誘導するが、5型E1A遺伝子にはその能力がない事を明らかにした。同12型E1B遺伝子の下流に転写終結の信号となる塩基配列があることを見つけた。E1A遺伝子のin vivo転写を見るとき、これまでに同定されたアデノウイルス中で強腫瘍原性を示す12型だけが2つの部位から転写を開始することに注目し、in vitro系での再現を試み成功した。トリアデノウイルス1型DNAのトランスフォーム能を調べ、ウイルスDNAの地図単位(m.u.)を用いて表すと0-7.7m.u.〔3.2Kb(キロ塩基)〕と22-31.5m.u.(4.3Kb)がフォーカス形成能とコロニー形成能を兼ね備えた、6塩基判別制限酵素で切り出せる、最短のウイルスDNA断片の組合せであることを明らかとした。これらのウイルスDNA領域のうち0-7.7m.u.の塩基配列を決定し、Ficketらの方法によってそのアミノ配列を推定した。イヌアデノウイルス2型DNAによってトランスフォームさせたどの3Y1細胞でも、ウイルスDNAr鎖の0-4.5m.u.領域から1KbRNAが、また、4.5-11m.u.領域からは1.1Kb,2KbのRNAが転写されていることを明らかとした。

The first step in the analysis of the early stages of E1A gene expression is to isolate and re-express the gene expression of E1A gene. A detailed analysis of the DNA fragments introduced into 3Y1 cells was conducted on the same type of E1A gene. The similarity between the two types is low, and the relationship between the two types is direct. The co-introduction of V-ab1 gene into 3Y1 cells was observed. Type 12 E1A gene is capable of inducing intracellular DNA and type 5 E1A gene is capable of inducing DNA. The same type 12 E1B gene downstream write termination signal E1A gene in vivo writing, the same time, the same time, the same Type 1 DNA can be modulated and located at the m.u. level. 0-7.7m.u. [3.2Kb()] 22-31.5m.u. (4.3Kb) The combination of DNA fragments with the shortest DNA fragments can be distinguished by the combination of DNA fragments with the shortest DNA fragments. The sequence of DNA fragments from 0 to 7.7 m. u. was determined by Ficket's method. Type 2 DNA is encoded in the domain of 0-4.5m.u. of the 3Y1 cell, 4.5-11m.u. of the 1Kb RNA, 4.5-11m.u. of the 2Kb RNA.