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ヒトがんへのパピローマウィルスの関与--疫学的研究を中心に--

乳头瘤病毒与人类癌症的关系--聚焦流行病学研究--

基本信息

批准号：
05151075
负责人：
石橋正英
金额：
$ 16.64万
依托单位：
Aichi Cancer Center Research Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05151075/
关键词：
ヒトパピローマウィルス PCR法子宮頸部 DNA がん抗体

项目摘要

できるだけ多種類の粘膜向性ヒトパピローマウイルス(mHPV)のDNAを効率よくPCR法で増幅できる“consensus"primerと,増幅したDNAの型判定法とを樹立するため,E6-E7領域で増幅して制限酵素切断地図で判定するS方式,L1 5′末領域で増幅して制限酵素切断地図で判定するT方式,及び,L1 3′末領域で増幅して,膜上に固定した標準HPV DNAとのハイブリッド形成率で判定するN方式の3方式が班員によって開発されてきた。今年度は1)標準HPV DNAを鋳型として,3方式のprimer活性スペクトルを調べた。2)また,同一試料の3方式による分析結果の整合性についての協同研究も継続した。その結果,次の点が明かとなった。S方式は頸がん関連の殆どのmHPVDNAには有効である。T方式は頸がん関連は無論,それら以外に少なくとも28種類のmHPV DNAに対応できる。N方式はT方式よりスペクトルがやや狭い。T方式で増幅したDNAにN方式の判別法を用いると,感度は高くノイズが極小となる。これらの結果などを勘案すると,婦人科等での通常の調査研究での基準的な方法としては,先ず,T方式で試料を調査し,確かな型判別が得られない場合は,S方式を用いて再調査を行なうことが望ましい。勿論,T方式やS方式で増幅したDNAにN方式の型判別法を用いれば,精度は向上する。また,頸がんに限られた調査では,先ず,S方式で調査し,確かな結果が得られない試料はT方式などで調査することが得策であろう。また,分子汚染に対する手順を踏むことを決して怠ってならない。6名の班員から前向き及び後向きの経時的な調査研究の結果が昨年より集積度の高い形で報告された。3名の班員から子宮頸がん,同腺がん,喉頭がんにおけるmHPV感染とp53変異との調査結果が報告された。HPV16のL2抗体調査法が樹立され,E6,E7などの抗体上昇が子宮頸がん患者に限られるのとは異なり,L2抗体上昇は同部異形成の患者にも認められることが判った。

DNA typing for multiple types of mucotropic HPV (mHPV) is performed by PCR with increasing amplitude of consensus primer, increasing amplitude of DNA typing determination method,E6-E7 region with increasing amplitude of restriction enzyme cleavage determination method,L1 5 'region with increasing amplitude of restriction enzyme cleavage determination method, and L1 3' region with increasing amplitude of restriction enzyme cleavage determination method. The standard HPV DNA was immobilized on the membrane, and the formation rate of HPV DNA was determined by three methods: N method and 3 method. This year, the standard HPV DNA type is 1, and the primer activity is 3. 2) The results of the 3-way analysis of the same sample are integrated and collaborative. The result is that the second point is clear. S mode is not related to mHPV DNA. The T pattern is related to all but 28 types of mHPV DNA. N way T way T pattern increases in amplitude and N pattern discriminates in use, sensitivity increases in amplitude and N pattern discriminates in use. The results of this investigation were compared with those of the general investigation of female subjects. The standard method of investigation was first investigated by T method, and the type discrimination was confirmed. In the case of S method, the investigation was conducted again. Regardless of whether T or S patterns increase in amplitude or N patterns in DNA, the accuracy of the method is improved. The results of the investigation were obtained by S method and T method. The molecular contamination is a problem. The results of a survey conducted by six shift members in both forward and backward directions are reported in a highly integrated manner last year. Three of the shift members reported mHPV infection and p53 heterosis in the cervix, pancreas and larynx. HPV16 and L2 antibody detection method is established,E6 and E7 antibodies are increased in cervical cancer patients, and L2 antibodies are increased in allogeneic cancer patients.