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マクロファージ様株化細胞J774・1が産生する腫瘍傷害性蛋白の研究

巨噬细胞样细胞系J774.1产生肿瘤毒性蛋白的研究

基本信息

批准号：
61015016
负责人：
名取俊二
金额：
$ 1.79万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1986
资助国家：
日本
起止时间：
1986 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61015016/
关键词：
マクロファージ TKF TNF 細胞傷害性蛋白リセプター L929 J774.1

项目摘要

この研究は、マウスマクロファージ様株化細胞J774.1を、センチニクバエレクチンで刺激した時に、培養液中に放出される腫瘍特異的な細胞傷害性蛋白(Tumor Killing Factor,以下TKFと略す)に関するものである。この蛋白は、そのトリプシン分解物のアミノ酸配列の解析から、腫瘍壊死因子(TNF)と類似の蛋白と考えられる。マウスの腫瘍細胞株の中には、TKFに感受性で低濃度のTKFで細胞が溶解するものと、非感受性で高濃度のTKFにも応答しないものがある。本年度は、このような選択毒性がどのような機構で発現するかを中心に解析した。まず、細胞表面のTKFリセプターの解析を行なった。J774.1細胞の培養上清からTKFを単一蛋白として精製し、これをin vitroにおいて、【^(125)I】で標識する。このようにして得られるTKFは、61%の生物活性を有していた。この標識TKFと種々の腫瘍細胞との結合を調べると、感受性細胞、非感受性細胞を問わず、TKFのリセプターの存在が認められた。ただし、そのリセプターの数は、感受性細胞では細胞1個当り2000-9000個、非感受性細胞では500-1200個と、一般に非感受性細胞の方が少なかった。しかし、このリセプターの数の差だけでは選択毒性は説明がつかない。そこで、典型的な感受性細胞であるL929細胞を使い、標識TKFの取り込みを調べた。その結果、L929はTKFを取り込むが、サイトカラシンDやコルセミドといった薬物存在下には、TKFに対する感受性が低下することがわかった。この事実は、TKFを含むエンドゾームとリンゾームの融合がおこらなければ、TKFの毒性は発現されないことを示唆する。事実、L929細胞中ではTKFの速やかな分解が認められるが、非感受性細胞中ではTKFの分解は見られなかった。このことから、TKFの分解産物の中に毒性の本体があり、非感受性細胞ではTKFの分解がないために毒性が現れない可能性が考えられる。

Cell J774.1, cell J774.1, cell line J774.1, cell line J774.1, culture medium, culture medium, culture solution, culture medium, culture "protein", "protein", "hydrolysate", "acid", "analysis", "death factor (TNF)" type is similar to the protein test. In the cell line, the susceptibility was low, the sensitivity was low, the TKF was low, the cytolysis was not sensitive, and the non-susceptibility was high, TKF. In this year's election, the toxic and pharmaceutical institutions will be able to find the center to analyze the toxic drugs. On the cell surface, TKF the cell surface and analyze the cell surface. J774.1 cell culture supernatant, TKF protein, protein concentrate, in vitro protein, and [^ (125) I] tag. The results showed that the biological activity of TKF and 61% of the bioactivity were detected by Elisa. The label recognizes that there is a recognition factor in the combination of TKF cell markers, receptive cells, non-receptive cells, and TKF cells. There are 2000-9000 non-receptive cells, 2000-1200 non-receptive cells, and a small number of non-receptive cells. If you don't know what to do, you have to choose the toxicity test. For example, the typical receptivity cell, the L929 cell, and the tag TKF cell are selected from each other. The results showed that the results of L929 TKF test, L929, L929, L929. In the case of TKF, there is an indication of instigation in the case of fusion, toxicity, toxicity, and so on. In the cells of L929, L929 and L929, the TKF was broken down, the TKF was broken down, and the non-receptive cells were broken down. In the decomposition of toxic substances, TKF decomposable substances, non-receptive cells, TKF, decomposition, toxicity, possibility, possibility.