麻ひ性貝毒生産渦鞭毛藻Protogonyaulax属細胞のプラスミドについて

关于原角藻属麻痹性贝类产毒素甲藻细胞的质粒

• 批准号: 61560242
• 负责人: 西尾 幸郎
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Shikoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61560242/
• 关键词: Protogonyaulax tamarensis; 麻ひ性貝毒; プラスミド

1986年4月、瀬戸内海東部海域にProtogonyaulax tamarensisが最大3740細胞/mlの濃度で赤潮となり、アサリ,マガキ,ムラサキイガイなどが毒化した。プランクトンの麻ひ性貝毒(PSP)組成を調べると、低毒性のφX1,2とGTX5を著量に含有していることが分った。これまで北日本に発生して来たP.tamarensisは、強毒性のGTX1が主成分であることから、今回の瀬戸内海での事例は、PSP組成の上で大きく異なる結果を与えた。この外、赤潮となるまで増殖しながら、二枚貝毒化期間は約1ケ月間と短いことなど、従来の知見と相違する事も多かった。この様な発生様式とPSP成分組成の両面にわたる変化には、必らず遺伝子レベルでの変異が関係していると考えられることから、プランクトンのDNAを分析した。すなわち、大量培養した藻体16gに、リゾチーム,RNase,プロナーゼを作用させ、低分子DNAを抽出した。そして、塩化セシウムによる密度匂配法で20℃,41,000rpm,35時間超遠心分離したところ、エチジウムブロミドによる単一バンドを分取することができた。これをアガロースゲル電気泳動に供すると、分子量1・3×【10^6】dalと測定された。NENSORBによる吸着テストなどから低分子DNAであることが確認された。分離されたDNAが、プラスミドとして自己増殖機能を保持しているかどうか、また、強毒性PSP成分をスルホン化する機能を有するかどうか等の諸問題を明らかにするため、P.catenella無毒株、底棲渦鞭毛藻Ostreopsis sp,ある種の藍藻細胞に、マイクロマニピュレーターを使用して注入し、形質転換能をもったDNAであることの確認実験を進めている。本研究課題は、1986年11月に許可された研究であるので、DNAの電子顕微鏡による形態観察、制眼酵素による切断、塩基配列分析などは、現在進行中であり、今すこし時間を要す。

In April 1986, Protogonyaulax tamarensis reached a maximum concentration of 3740 cells/ml in the eastern part of the Seto Inland Sea. PSP has a low toxicity and a low toxicity. This is the case of P. tamarensis, a highly toxic GTX1, a major component, and a PSP component. The period of poisoning of two shells is about one month. The DNA analysis of the PSP components was carried out on the basis of the analysis of the relationship between PSP components and PSP components. 16g, 16g, 16g, 16 The density distribution method for the separation of organic and inorganic compounds is 20℃, 41,000 rpm,35-time ultra-telecentric separation. The molecular weight of 1.3 × [10^6] dal was determined. NENSORB is a low molecular DNA molecule. Isolation of DNA, maintenance of its reproductive function, identification of highly toxic PSP components, identification of non-toxic strains of P. catenella, Ostreopsis sp, species of cyanobacterial cells, use of DNA injection, physical and chemical transduction of DNA, etc. This research project was approved in November 1986, and is currently underway due to morphological observation, enzyme cleavage, and gene alignment analysis of DNA by electron microscopy.

项目成果

西尾幸郎 その他: 日本水産学会誌.

西尾幸雄等：日本水产学会杂志。