オリゴペプチドを固定した生体接着材料の設計と構造機能の相関性

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本研究は, 細胞接着機能をもつ糖タンパク質であるフィブロネクチンの細胞接着性部位のモデルとなるオリゴペプチドを合成し, これを固定化した高分子材料について細胞接着機能とオリゴペプチドの構造の相関性を検討することを目的とするもので, 本年度は先ず, Arg-Gly-Asp-Serシークエンスを含むオリゴペプチドを必要量, 科学合成することから始めた. ある程度の量の試料を得るための化学合成法としては溶液法が適当と考えられるが, こゝではスペーサーとなるオリゴグリシンの鎖長を定量的に制御して導入するために固相法を採用し, かつ反応を迅速に行わせるために超音波の利用を新たに試みた. 固相法のための担体樹脂としてはオリゴペプチド合成後の脱樹脂が容易であるtert-ブチルオキシカルボニアルアミノアシルー4-(オキシメチル)フェニルアセトアミドメチル化ポリスチレンを調製して用いた. 担体樹脂へのペプチド残基の付加は, Ser, Asp, Gly, Argの順で行ない, 次のスペーサーとしてGlyを3段階で付加させ, 最後にトリフルオロメタンスルホン酸処理を行なって担体樹脂および保護基を脱離させ, H-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp-Ser-OHを取得した. 得られたオリゴペプチドの確認のためにはアミノ酸分析ならびにFT-IR測定を行なった.固定化の高分子材料としてはアクリル酸-エチレン共重合体, ビニルアルコールーエチレン共重合体, その他を予定しているが, 先ず, アクリル酸-エチレン年重合体膜についてその表面構造をESCAで解析し, 表面に存在するカルボキシル基を利用してオリゴペプチドをスペーサーのN末端で固定化する実験を目下実施中である. また, これと平行して, アミノメチル化ポリスチレンを担体とし, これにSer, Asp, Gly, Argを遂次付加さ, 担体はそのまゝで, 保護基のみを脱離させた試料を調製し, 目下, この試料について細胞接着特性を予備的に検討中である.