染色体分子構成解析技術の開発

染色体分子组成分析技术的发展

• 批准号: 62615511
• 负责人: 小原 雄治
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1987
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1987 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62615511/
• 关键词: 染色体ライブラリー; ondered clone bank; 大腸菌染色体; 制限酵素地図; 8塩基設識制限酵素; linkingクローン

本研究は, 染色体ライブラリーを元の順序に並べかえ, 互いに重なり合って染色体全体をおおうクローンのセットを作成し, 遺伝地図と対応づける, 一連の技術の開発を行うものである. 大腸菌染色体を材料とし, その遺伝地図と物理地図の完全な総合化学を目指した.すでに, (i)多数のラムダファージクローンについて, 8種類の6塩基設識制限酵素の切断点地図を極めて高能率に作成し, 切断点のパターンをコンピューターで比較することにより, 重なり合うクローンを次々に見つけ出し, contig(重なり合ったクローンのグループ)に分類する, (ii)多数のファージクローンのプラークを高密度に作り, そのレプリカを多数とってcontigを橋渡しするクローンを効率よく提索する方法を開発した. 大腸菌染色体に応用し, 総計3400クローンを調べた結果, 175-1500kbの7個のcontigに分類した.しかし, 最終段階では, クローン化されにくい領域があることなどのためにcontig間の配列決定が非常に困難となっている. そこで, 各contigの前方の制限酵素地図を染色対DNAについて直接作成する方法を開発し, それらを較べることによ り, contig間の配列を最終決定し, 約4700kbの制限酵素地図を完成させた. 約70の遺伝子マーカーと対応づけることにより, 遺伝地図との対応づけをした.更に, 8塩基認識制限酵素切断点を含む. いわゆるlinkingクローンの新しい提索法を開発し, NatI, SfiIそれぞれ27, 32ヶ所の切断点をクローンのセット中に同定した. パルスフィールドゲル電気泳動などと組み合わせた, 新しいcontig配列決定法を考案している.

In this study, the chromosomes were sequenced and sequenced, and all the chromosomes were linked to each other. in this study, the chromosomes were sequenced and analyzed in this study. The chromosomes of Magnolia macrocephalus are used as materials, physically, physically, chemically and chemically. In most cases, (I) there are significant differences between the two systems, (I) most of the systems, (I) most systems, (I), (I), (I (ii) most people do not require high density, and most of them use the contig method to determine the rate of high density. The total number of chromosomal contig of Macletotrichum spp. Was 3400. The results showed that 7 samples were classified from 175to 1500kb. I don't know, I don't know. In the front of each contig, the enzyme restriction enzyme staining method was used to make the DNA enzyme assay directly. The method was used to determine the activity of the enzyme, and the 4700kb enzyme was used to complete the enzyme restriction test. About 70 percent of the time, I don't know, I don't know, I don't know. In addition, the cut-off point of the enzyme is limited by 8-base recognition. The new method of citation is open, and the cut-off points of NatI, SfiI, 27, 32 are the same as those in the same order. We need to learn more about the combination of the swimming program, the new contig and the decision-making method for the examination.

项目成果

小原 雄治: 生物物理. 27. 247-250 (1987)

大原雄二：生物物理学。27。247-250（1987）

小原 雄治: 細胞工学. 6. 839-846 (1987)

大原雄二：细胞工程。6. 839-846 (1987)