がん原物質によるDNA損傷、修復と誘発突然変異特異性のシャトルベクターによる解析

使用穿梭载体分析致癌物引起的 DNA 损伤、修复和诱导突变特异性

• 批准号: 63010040
• 负责人: 加藤 武司
• 金额: $ 5.89万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63010040/
• 关键词: HPRTcDNA遺伝子; Trp-P_2誘発変異; 突然変異スペクトル; PCR法

シャトルベクターによって、ヒトHPRTcDNA遺伝子をもつマウス培養細胞をTrp-P_2で処理し、誘発されたHPRT細胞クローン74株を分離した(木村)。各変異差クローンからCOS細胞との融合法でcDNAHPRT-変異遺伝子DNAを回収、シーケンシングによって変異塩基配列を同定した(加藤、尾川)。変異した塩基配列を詳細に検討すると、塩基置換および1〜2塩基欠失によるフレームシフト変異がほとんどで、両者はほぼ等しい割合で生じていた。それらの変異のほとんどは、グアニン(G)又はテミン(T)塩基の位置で生じていることがわかった。Trp-P_2のがん原性は代謝活性化されたTrp-P_2^*が特異的にグアニンの8位炭素に共有結合した、C^8G附加体が原因と考えられるている。今回得られた結果は、GおよびTが同程度に関与していることを示しており、現在さらに詳細に検討中である。IQによる突然変異誘発は、頻度が低いため変異クローンの収集が難しく(自然誘発のものとの区別がむずかしい)、とり止めとしAAAFを検討中(木村)。マウスリンパ球培養細胞の変異原感受性株(野性型、M10、Q3、MMC)のIQによる6TG^R変異誘発頻度は、いずれも野性型の細胞と変化はなかった(佐藤)。また、ヒトDNA修復欠損(XP、AT)症患者由来の培養リンパ球細胞の、自然およびUV、X線誘発6TG^R変異クローンのゲノムHPRT遺伝子をサザンブロットで調べた結果は、バンドの一部欠失が認められたのは、自然誘発で10〜20%、X線で50〜70%、UVでは0〜10%であった。AT細胞では自然誘発でも欠失が高い頻度でみられた(立花)。ゲノム遺伝子の解析法として最近開発されたPCR法は、がん関連遺伝子の解析にも有用であるので、cDNAおよびゲノムHPRT遺伝子の変異をPCR法で解析するため、基礎的研究に着手し染色体に組み込まれたcDNAHPRT遺伝子をPCR法で増巾、シーケンシングできるところまできている。(松永、加藤)

The strains were isolated from the cells of HPRTcDNA, HPRTcDNA, Trp-P_2, and Kimura. The data of each group is the same as that of the COS cell (Kato, Ogawa), which is based on the fusion method of cDNAHPRT-, the sub-DNA, and the sub-cell. There are some problems in the base configuration, such as the base configuration, the base configuration, the loss of the base, the failure of the base, and so on. Please tell me that the location of the base unit (G) is different from that of the normal one (G). There is a common combination of 8-bit carbon compounds in Trp-P_2 active Trp-P_ 2 ^ * features, and the cause of C ^ 8G appendages has been tested. This time, I got the results of the test results, and I got the same level of information as I did. I don't know if I'm going to get the results. All of a sudden, the IQ temperature is low, the temperature is low, the temperature is low The original susceptible strain (wild type, M10, Q3, MMC) was isolated from the wild type (wild type, M10, Q3, MMC), and the wild type (Sato) was isolated from the wild type. The causes of patients with DNA deficiency (XP, AT) are as follows: cell culture, natural UV, X-ray

项目成果

K.Sugamoto,et al.,: J.Radiat.Res.29. 211-219 (1988)

K.Sugamoto 等人，：J.Radiat.Res.29。

H.Iyehara-Ogawa,et al.,: Mutation Res.204. 117-121 (1988)

H.Iyehara-Okawa 等人：Mutation Res.204。

H.Shinagawa,et al.,: Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 85. 1806-1810 (1988)

H.品川等人，：Proc.Natl.Acad.Sci.USA。

K.Sato,et al.,: Exp.Oncol.7. 39-43 (1988)

K.Sato 等人：Exp.Oncol.7。

H.Ikehata,et al.,: Mutation Res.210. 237-247 (1989)

H.Ikehata 等人：Mutation Res.210。