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がん原物質によるDNA損傷、修復と誘発変異特異性のシャトルベクターによる解析

使用穿梭载体分析致癌物引起的 DNA 损伤、修复和诱导突变的特异性

基本信息

批准号：
01010036
负责人：
加藤武司
金额：
$ 7.36万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01010036/
关键词：
TrpーP2 変異原特異性 DNA修復シャトルベクター PCR HPRT^ー遺伝子

项目摘要

本年度各班員の研究成果の大要を次項に記す。(i)シャトルベクターによるTrpーP2誘発突然変異の詳細な解析から、TrpーP2の変異一がん原性はDNAのグアニン附加体(C8GーTrpーP2)の生成による変異生成が主要であること、その誘発機構としてSlippage misalignmentモデルを提示した(加藤、木村)。この仮説を更に検証するため、AAFおよびOHーTrpーP2誘発変異の解析を行った。(ii)真核細胞でのこれら新しい知見を、データーの蓄積の多い大腸菌で比較するためIQおよびTrpーP2の変異スペクトルの解析を進めている(大西、尾川)。(iii)突然変異誘発とはDNA修復欠損の関係を調べるため、XP、AT細胞株にシャトルベクターを導入した系を樹立した。それを用いて、発がん物質により誘発された突然変異の解析を進めている。(古山)。(iv)シャトルベクター系では、cDNA遺伝子を用しているがゲノム遺伝子での研究も重要である。遺伝子増巾法(PCR法)の応用によってゲノム遺伝子の解析も可能となってきた。ヒトのゲノムHPRT遺伝子の突然変異をPCR法で解析する方法をほぼ確立した(加藤,松永)。立花らによって、これまでにサザンブロット法で解析されたヒト、リンパ芽球のHPRT変異細胞のゲノムHPRT遺伝子をPCR法で詳細に解析する実験がスタートした(巽)。(v)マウス培養細胞の修復欠損株を用いて、IQによる突然変異誘発頻度を調べたが、これまで高い感受性を示す修復欠損株は見つかっていない(佐藤)。

The research results of each class member of this year are summarized in the following items. (i)Trp-P2 induced mutation detailed analysis, Trp-P2 induced mutation a genetic DNA aptamer (C8G Trp-P2) generated mutation generation mainly due to the induction mechanism and Slippage misalignment tips (Kato, Kimura). The analysis of the difference between AAF and OH Trp induced by the above two factors is carried out. (ii)Eukaryotic organisms are new to the knowledge, accumulation and analysis of Escherichia coli (Onishi, Ogawa). (iii)The relationship between DNA repair defects and gene expression was investigated in different cell lines, XP and AT. The analysis of sudden changes in the use of chemicals and substances (Ancient Mountain). (iv)It is very important to study the gene expression of cDNA. The PCR method can be used to analyze the DNA sequence. The method of PCR analysis of HPRT gene mutation was established (Kato, Matsunaga). The HPRT gene of the HPRT variant cells in the bud was analyzed in detail by PCR method. (v)The repair of defective plants in cultured cells was carried out in the middle of the test, IQ was adjusted, and the frequency of sudden induction was adjusted. The high sensitivity of repair defective plants was indicated.