ミューテーター癌遺伝子をモデルとした環境変異源の発癌リスクと遺伝要因

以突变癌基因为模型的环境突变基因的致癌风险和遗传因素

• 批准号: 07263241
• 负责人: 加藤 武司
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07263241/
• 关键词: ミユ-テーター癌遺伝子; ミスマッチ修復; hMLH1; ゲノム不安定性; 遺伝要因; 突然変異スペクトル

ヒト遺伝性非ポリポ-シス大腸癌(HNPCC)細胞は、ミスマッチ修復遺伝子に欠損をもち突然変異を高頻度に誘発することがしられている。この研究では、それら細胞に誘発されるHPRT遺伝子突然変異を詳細に解析する。使用した細胞は、遺伝性非ポリポ-シス大腸癌(HNPCC)組織由来で、ミスマッチ修復遺伝子hMLH1に欠損をもつHCT116と、同じくGTBP遺伝子の欠損をもつHCT-15、DLD1である。本年度は、hMLH1をもつHCT116細胞に重点を置き、HPRT遺伝子での突然変異を多重PCRとcDNAシーケンシングによって詳細に解析した。得られた成果の概要を以下に記す。(1)ミユ-テーター癌遺伝子hMLH1に欠損をもつHCT116、同様にGTBPに欠損をもつHCT-15、DLD-1細胞の自然誘発6TG抵抗性突然変異頻度は、正常細胞の突然変異頻度より100倍ほど高い値を示した。またいずれのミユ-テーター細胞も、G:Tミスマッチを誘発するMNNGによる致死作用に対して正常細胞より著しく抵抗性であった。これらの結果は、いずれの細胞もG:Tミスマッチ塩基の修復に欠損をもつとすれば説明できる特性である。(2)HPRT遺伝子変異の解析:ミユ-テーター癌遺伝子の誘発する突然変異の特性を詳しく調べるため、hMLH1に欠損をもつHCT116細胞の自然誘発6TG変異クローンを多数採集し、多重PCRとcDNAのシーケンシングの併用によりHPRT遺伝子に生じた突然変異を解析した。得られた突然変異スペクトルから、ミスマッチ修復遺伝子に欠損をもつHCT116細胞の突然変異は、正常細胞の突然変異に比して下記のような著しい特異性を示す。(i)数bp以上の欠失/挿入は無く、約50%は塩基置換で、他は3bp以下の欠失/挿入とスプライシング異常である、(ii)それら変異の大半はG:C位置で生じている。このような特異性は、HCT116細胞がG:Tミスマッチ塩基の修復遺伝子hMLH1に欠損をもつこととを良く符合している。現在、変異配列の見つかっていないクローンについての検討と、スプライシング変異クローンについて、その原因である変異配列の同定を進めており、より詳細な突然変異スペクトルの完成を目指している。

Human colorectal cancer (HNPCC) cells are damaged or damaged due to sudden changes in frequency. This study analyzed in detail the sudden changes in HPRT gene expression induced by cellular proteins. The use of cellular, genetic non-polycystic colorectal cancer (HNPCC) tissue origin, genetic repair gene hMLH1 damage, HCT-116, GTBP gene damage, HCT-15, DLD1 damage. This year, hMLH1 gene expression was detected in HCT116 cells, and HPRT gene expression was analyzed in detail. A summary of the results obtained is given below. (1)The frequency of sudden changes in TG resistance in DLD-1 cells is 100 times higher than that in normal cells. In addition to the above, it is also possible to induce the death of MNNG in normal cells. The result is that the cells are damaged and the cells are damaged. (2) Analysis of HPRT gene mutation: the mutation of HPRT gene induced by HMLH1 gene was analyzed in detail, and the mutation of HMLH1 gene induced by HCT116 cell was analyzed in detail. The sudden change of HCT116 cells and the sudden change of normal cells were recorded below. (i)A few bp or more of the missing/missing elements are absent, about 50% of them are substituted, and the missing/missing elements below 3 bp are abnormal.(ii) Most of them are abnormal at the G:C position. The specificity of HCT116 cells is not satisfied with the repair gene hMLH1. Now, the difference between the two sets of data, the difference between the two sets of data.

项目成果

Suzuki,M.: "LET dependence of cell death,mutation induction and chromatin damege in human cells irradiated with accelerated carbon ions" Adv.Space Res.18(1/2). 127-136 (1996)

Suzuki,M.：“用加速碳离子照射的人类细胞中细胞死亡、突变诱导和染色质损伤的 LET 依赖性”Adv.Space Res.18(1/2)。

Kagawa, Y.: "Analysis of mutation in the human HPRT gene induced by accelerated heavy-ion irradiation." J. Radiat. Resa.36(3). 185-195 (1995)

Kakawa, Y.：“加速重离子辐照诱导的人类 HPRT 基因突变分析。”

Shimahara, H.: "Spectrum of in vivo hprt mutations in T Iymphocytes from Atomic bombsurvivor. I. Sequence alterations in cDNA." Carcinogenesis. 16(3). 583-591 (1995)

Shimahara, H.：“原子弹幸存者 T 淋巴细胞体内 hprt 突变谱。I. cDNA 序列改变。”