造血幹細胞・骨髄間質細胞間細胞膜接着分子の機能解析と白血病細胞発生における役割
造血干细胞与骨髓基质细胞间细胞膜粘附分子的功能分析及其在白血病细胞发育中的作用
基本信息
- 批准号:63015011
- 负责人:
- 金额:$ 3.26万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Cancer Research
- 财政年份:1988
- 资助国家:日本
- 起止时间:1988 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
ヒト骨髄間質細胞株(KM-101,102)、および骨髄系血液細胞株を免疫源としてBalb/cマウス腹腔に繰り返し接種することによりモノクロナール細胞膜抗体を産生するハイブリドーマを採取した。このうちの2クローンはin vitroで間質細胞株-血液細胞株の接着を強く増強した。ヒト間質細胞株の膜成分を可溶化後、この抗体を用いてウエスタンブロッティングを行ったところ、一つの抗体(C-F-9)は膜蛋白非還元の状態で分子量約22万の分子を認識していた。しかし、膜蛋白を還元した試料では明確なバンドは得られなかった。C-F-9ハイブリドーマはIg G_1サブクラスの免疫グロブリン抗体を産生している。このハイブリドーマをマウスの腹水系にして大量の抗体を得、この抗体を精製した。精製抗体をパパインにて処理し、Fabフラグメントを調整してから、in vitroの間質細胞株-骨髄系血液細胞株間の接着阻止試験を行ったところ、抗体そのものでは接着増強がみられたが、Fabフラグメントを処理することにより、接着の阻止が観察された。更に、この精製抗体をSepharose 4B CLの担体にカップリングし、抗原の精製を試みた。精製抗原を還元、非還元の状態でSDS-PAGEにて電気泳動を行ったところ非還元の蛋白は分子量約22万の単一なバンドとして銀染色で認識された。還元した蛋白は分子量11万と10万5千の2本のバンドとして認識された。以上の結果は、この分子がheterodimerからなり、hetrophilicな細胞間の接着に関与する分子であることを示唆する。現在、この分子のアミノ酸配列の検索、遺伝子のクローニングを計画中である。
Bone marrow stromal cell lines (KM-101, 102) and bone marrow blood cell lines are immune sources. The growth of stromal cell lines and blood cell lines in vitro is increasing. After the membrane components of stromal cell strains were solubilized, the antibody was used to detect the molecular weight of the membrane protein (C-F-9). The membrane protein is also present in the sample. C-F-9 is the first to produce an anti-HIV antibody. A large number of antibodies were obtained. Refined antibodies are processed in vitro, Fab cells are adjusted in vitro, and then blocked in vitro. In addition, the purification of the antibody Sepharose 4B CL support was carried out. The purification of the antigen was tried. The purified antigen was identified by SDS-PAGE in the form of reduced and non-reduced proteins with a molecular weight of about 220,000. The molecular weight of the protein is 110,000 and 105,000. These results indicate that the molecules involved in heterodimer and hetrophilic cell adhesion are related to the molecular structure. Now, the molecular structure of the acid sequence of the discovery, genetic analysis of the development of the project.
项目成果
期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
FitzGerald,TJ,Santucci,MA;Harigaya,K.et al.: International Journal Radiation Oncology Biology Physics. 15. 1153-1159 (1988)
FitzGerald,TJ,Santucci,MA;Harigaya,K.等人:国际杂志放射肿瘤学生物学物理学。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Ohkawa,H.;Mikata,A.;Harigaya,K.;Ueda,R.: Experimental Hematology. 17. 30-33 (1989)
Ohkawa,H.;Mikata,A.;Harigaya,K.;Ueda,R.:实验血液学。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Kohama,T.;Handa,H.;Hariagya,K.: Experimental Hematology. 16. 603-608 (1988)
Kohama,T.;Handa,H.;Hariagya,K.:实验血液学。
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$ 3.26万 - 项目类别:
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