ALTERED MHC クラスI抗原遺伝子の分離、構造解析と癌細胞における発現状況

癌细胞中改变的 MHC I 类抗原基因分离、结构分析和表达状态

• 批准号: 01015030
• 负责人: 田中 憲一
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01015030/
• 关键词: 腫瘍細胞; HLAクラスI抗原; 核酸配列; Nobel MHC抗原; 遺伝子導入

SV40癌化ヒト線維芽細胞より作製したcDNAライブラリィーの検索によりNobel MHCクラスI抗原をコードすると思れるクローン(PIO)を分離、サンガー法により約90%の核酸配列を決定、他のHLA遺伝子との比較を行った。(1)既に発表されたクラスI遺伝子のほとんどにおいて、2ケのイニシェーションコドンが報告されているが、p10においては単1のみである。(2)他のHLAクラスI遺伝子との比較においてalpha1ドメインは80%、alpha2ドメインは81%、alpha3ドメインは93%、トランスメンプランドメインは70%、サイトプラスミックドメインは76%のホモロジーを示した。(3)Alu反復配列が3末端側非飜訳部分中央にみとめられ、ポリ(A)アデニリレーション部分を提供している事が観察された。(4)トランスメンブレン部分の疎水結合は良く保れており、p10によりコードされる分子が細胞表面に発現している事が示唆された。(5)同一細胞より作成したジェノミックライブラリィーよりp10に対応するジェノミッククローンを分離、5末端側の核酸配例を約1kb行った。その結果、従来よく認められるTATAボックス部分の核酸配例がTCTAAAであり、AがCに変換している事が認められた。(6)p10を種々の培養ヒト癌細胞株(ヒト胃癌細胞、ヒトメラノーマ、ヒト子宮頚癌、ヒトBリンパ腫、ヒト肺癌細胞)に遺伝子導入を行ったところ、全ての細胞において発現が認められた。特にBリンパ腫細胞において高度の発現が観察され、組織特異性の存在する事が示唆された。

SV40 cancer line cells were isolated from cDNA sequences and compared with Nobel MHC I antigen sequences (PIO). About 90% of nucleic acid sequences were determined by PCR. (1)In addition to the above, it is also reported that the number of cases reported by the Ministry of Foreign Affairs and the Ministry of Foreign Affairs in the Ministry of Foreign Affairs is 10. (2)The ratio of HLA class I to HLA class I was 80%, 81%, 93%, 70% and 76% respectively. (3)Alu repeated arrangement is provided in the center of the non-terminal part of the terminal side. (4)The molecular structure of the cell surface is well preserved and the molecular structure of p10 is well developed. (5)The same cell was prepared with a DNA sequence of about 1kb. The result is that the nucleotide sequence of TCTAA is identical to that of A. (6)p10 gene was introduced into cultured cancer cell lines (gastric cancer cells, uterine cancer cells, breast cancer cells, lung cancer cells), and gene expression was detected in whole cells. In particular, the presence of highly detectable, tissue-specific proteins in B-cell tumors was demonstrated.