白血病細胞における癌遺伝子の相互作用

白血病细胞中癌基因的相互作用

• 批准号: 01015018
• 负责人: 高久 史麿
• 金额: $ 6.02万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01015018/
• 关键词: ras癌遺伝子; abl癌遺伝子; ポリメレース・チェーン・リアクション; ltk遺伝子

ヒト白血病細胞における癌遺伝子の機能、相互連関を明らかにする目的で、これまでにPCRを用いてNーRAS、ABLなどの既知の癌遺伝子の活性化の有無を検討した。更に、白血病細胞に特異的に発現している新しいタンパク質チロシンキナーゼ遺伝子であるヒト1+K遺伝子のcDNAをクローニングし、その構造、発現、機能について検討した。1.PCRによる活性化癌遺伝子の検出種々のヒト白血病、前白血病よりDNAもしくはRNAを抽出し、ヒトNーRASをPCRもしくはRTーPCRにより遺伝子増幅した。急性白血病18例中5例、慢性白血病12例中0例、前白血病状態23例中3例にNーRASコドン12、13、61における点突然変異を検出した。この検出感度は全細胞の1%に点突然変異が存在すれば、これを検出できた。更に、RTーPCRによりBCR/ABL再配列mRNAの有無を検討した。慢性骨髄性白血病、Philadelphia染色体陽性急性リンパ性白血病の全例に再配列mRNAが検出された。この検出感度は10^6細胞に1つの突然変異細胞を検出できた。このように、PCRを用いると非常に高感度、簡便に突然変異を検出でき、患者の経過を観察する上で、有意義であった。II.新しいチロシンキナーゼ遺伝子1+Kヒト白血病に関与していると思われる新しい癌(関連)遺伝子を同定する目的で、ヒト白血病細胞株であるK562のcDNAライブラリーをcーfmsプローブで低ストリンジェンシーで、スクリーニングしクローニングを得た。構造解析により、これはマウスで報告された1+Kのヒトホモログであることが分かった。この遺伝子は膜貫通部位とチロシンキナーゼドメインを持ち、ROS遺伝子と強いホモロジーを示すいわゆるレセプタータイプのチロシンキナーゼである。18例の血液悪性腫瘍細胞(株)と17例の非血液悪性腫瘍株についてトザンハイブリダイゼーションにより発現を検討した。10例の血液悪性腫瘍(株)発現が見られたが、他の非血液腫瘍に見られなかった。

Leukemic cells can be used to activate cancer cells, to connect with each other to understand the purpose of cancer, to use RAS to treat PCR, and to use ABL to activate known cancer cells. Change, leukemias, leukemia cells are specific to the disease. This is the most common cause of disease in leukemia. This is not the case. The children of leukemia are suffering from the disease of cDNA. The active cancer cells of 1.PCR, DNA, RNA, and N-RAS, PCR, RT, PCR, leukemias, leukemias, leukemia, leukemia, 5 of 18 cases of acute leukemia, 0 of 12 cases of chronic leukemia and 3 of 23 cases of proleukemia were found to have a sudden onset of "N" RAS syndrome in 12, 13 and 61 cases. The sensitivity of the whole cell is 1%, and there is a sudden increase in the number of cells. More or less, RTPCR

项目成果

Fuyuki Ishikawa and Yukio Kobayashi: "Application of polymerse chain reaction to detect activated oncogenes in hematological malignancies." Acta hematologica Japonica. 52. 1433-1441 (1989)

Fuyuki Ishikawa 和 Yukio Kobayashi：“应用聚合酶链式反应检测血液恶性肿瘤中的活化癌基因。”

Hiroyuki Mano,et al.: "Mutations of Nーras oncgene in myelodysplastic syndromes and leukemias detected by polymerase Chain reaction." Jpn.J.Cancer Res.(Gann). 80. 102-108 (1989)

Hiroyuki Mano 等人：“通过聚合酶链反应检测骨髓增生异常综合征和白血病中的 N-ras 癌基因突变。”Jpn.J.Cancer Res.(Gann) 80. 102-108 (1989)。

Hiroyuki Mano,Fuyuki Ishikawa,Hisamaru Hirai and Fumimaro Takaku: "A novel tyrosine-kinase gene,tec,is overexpresseal in hepatocellular carcinoma cell lines."

Hiroyuki Mano、Fuyuki Ishikawa、Hisamaru Hirai 和 Fumimaro Takaku：“一种新型酪氨酸激酶基因 tec 在肝细胞癌细胞系中过度表达。”