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血小板由来の新規血管内皮細胞成長因子の分離とその臨床応用

新型血小板源血管内皮细胞生长因子的分离及其临床应用

基本信息

批准号：
61870033
负责人：
高久史麿
金额：
$ 17.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research
财政年份：
1986
资助国家：
日本
起止时间：
1986 至 1987
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-61870033/
关键词：
血管内皮細胞増殖因子血小板由来成長因子血小板

项目摘要

われわれは血小板中に既知の成長因子とは異なる、血管内皮細胞に比較的特異的に作用する成長因子(VEPF)が存在することを報告している。本研究では、その純化精製を行い、さらに、血小板中に存在することが知られている他の成長因子との比較を行った。1.方法(1)増殖促進作用の測定培養ミニブタ大動脈内皮細胞に試料を添加した後、トリチウムチミジンのDNAへの取り込みを測定した。(2)血小板抽出液多血小板血漿に塩化アンモニウムを加えて血小板を破壊し、さらに塩化カルシウムを加えてフィブリンを除去した。これにSulfadex gelを加えて、吸着した画分は血小板由来成長因子(PDGF)の純化精製に用い、非吸着画分をVEPFの純化に用いた。2.成績VEPFはSephadexG-75で分子量60,000および20,000の位置に溶出し、等電点4.0-4.8の酸性タンパク質で、熱や酸に不安定であるが、還元剤処理に対しては安定である。純化精製には、QAE-Sephadex クロマトグラフィ-、硫安沈殿、DEAE-Sepharose クロマトグラフィー,クロマトフォーカシング,ハイドロキシアパタイトクロマトグラフィー,TSK-4000カラムなどを用いた。その結果、VEPFはPDGF、上皮由来成長因子、トランスフォーミング成長因子と物質的に異なるものであることが明らかになった。

The existence of growth factors known to be present in platelets and in vascular endothelial cells is reported. This study compares the purification, purification and presence of other growth factors in platelets. 1. Methods (1) Measurement of proliferation promotion effect of cultured vascular endothelial cells After adding sample, DNA extraction from cultured vascular endothelial cells was measured. (2)Platelet aspirate, platelet rich plasma, platelet rich plasma The purification of PDGF and the purification of VEPF are carried out by adding Sulfadex gel, sorbing and separating. 2. The results of VEPF are that it dissolves at the molecular weight of 60,000 to 20,000 on Sephadex G-75, has an acidic isoelectric point of 4.0-4.8, is unstable due to heat and acid, and is stable due to reducing agent treatment. Purified, QAE-Sephadex, Thioanin, DEAE-Sepharose, Sephadex, Sephadex,TSK-4000, Sephadex. Results: VEPF, Epithelial-derived Growth Factor (EGF), Growth Factor (GF) and Substance (GF)