癌化におけるスーパーオキサイドの役割

超氧化物在致癌过程中的作用

• 批准号: 01015061
• 负责人: 谷口 直之
• 金额: $ 6.02万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01015061/
• 关键词: Cu_1Znースーパーオキサイドディスムターゼ; Mnースーパーオキサイドディスムターゼ; 非酵素的糖化; O^-_2; 卵巣癌; ELISA; 急性骨髄性白血病; TNF

癌化におけるO^-_2の意義を知る目的でSODを中心に以下の研究を行った。1)Cu、ZnーSODの非酵素的糖化(グリケーション):ヒトCu、ZnーSODがグリケーションをうけることを糖尿病患者、老化赤血球、Werner症候群赤血球で見出した。in vitroではSODはactive site liganding loopを形成しているLys122やLys128が優先的にグリケーションをうけ、活性を失う。早老症や癌化を主症状とするWerner症候群ではmultipleにグリケーションをうけ、著しく活性低下をみた。蛋白のグリケーションはO^-_2を産生することが知られておりSODのグリケーションはO^-_2の産生をたかめる。一方、SODの糖化による活性低下はO^-_2の蓄積を更に高め、老化、癌化に影響を及ぼすと考えられる。2)MnーSODの癌化による発現:ヒト肝からMnーSOD分離精製し、結晶化に成功した。本酵素を用い、モノクローン抗体を作成した。本抗体はMnーSODのC末端のペプチドをエピトープとしていた。免疫組織化学によりMnーSODは肝のミトコンドリアマトリックスに存在することを証明した。ELISAを確立し、腫瘍マーカーとしての有効性を確かめたところ、卵巣癌、特に上皮性の卵巣癌の良いマーカーとなることが明らかになった。従来用いられているCAー125に比し、false positiveが少く、良性腫瘍の陽性率は著しく低い。また急性骨髄性白血病では、蛋白レベル、mRNAレベルでの著しい発現がみられる。ヒト肝癌やラットの自然発症肝癌でも高値を示した。MnーSODの発癌機序を知るためTNFやインターロイキン1によるMnーSODの誘導をみたところ、Aー549やWIー38などの肺癌由来の細胞で著しく発現をみた。このことはオートクラインとしてインターロイキン1などを分泌する癌細胞がマクロファージなどの活性化によりO^-_2の産生をたかめ、この除去のためにSODが誘導されるものと考えられる。

To understand the significance of SOD in cancer transformation, the following research was carried out. 1) Non-enzymatic glycosylation of Cu and Zn SOD: Cu and Zn SOD are found in diabetic patients, aging red blood cells and Werner syndrome red blood cells. In vitro, SOD active site ligating loop is formed, and Lys122 and Lys128 are preferentially formed. Werner's syndrome is characterized by multiple symptoms of premature aging and cancer. The production of SOD in the production of O ^-2 On the one hand, the activity of SOD is low, the accumulation of O^-2 is high, aging and cancer are affected, and the results are analyzed. 2) The discovery of Mn SOD carcinogenesis: Mn SOD was isolated, purified and crystallized successfully. This enzyme is used to prepare antibodies. This antibody is called Mn SOD. Immunohistochemical evidence of the presence of Mn SOD in the liver For example, if you are a female, you may be a female. CA-125, false positive, benign tumor positive, negative. Acute osteoblastic leukemia is characterized by high levels of protein and mRNA. Liver cancer is a naturally occurring disease. The mechanism of Mn SOD development is known as TNF-α, TNF-α, TNF The production and removal of SOD in cancer cells are investigated.

项目成果

Taniguchi,N.: "The Maillard Reaction in Aging,Diabetes,and Nutrition." Alan R.Liss,Inc., 14 (1989)

Taniguchi, N.：“衰老、糖尿病和营养中的美拉德反应”。

Kawaguchi,T.: "Serum Mn-superoxide dismutase:Normal values and increased levels in patients with acute myocardial infarction and several malignant diseases determined by enzyme-linked immunosorbent assay using a monoclonal antibody." J.Immunol.Methods. 12

Kawaguchi,T.：“血清锰超氧化物歧化酶：使用单克隆抗体通过酶联免疫吸附测定测定急性心肌梗塞和几种恶性疾病患者的正常值和升高水平。”

Ishikawa,M.: "Reactivity of a monoclonal antibody against manganese superoxide dismutase with human ovarian carcinoma." Cancer Res.(1990)

Ishikawa,M.：“抗锰超氧化物歧化酶的单克隆抗体与人卵巢癌的反应性。”

Kawaguchi,T.: "A monoclonal antibody against COOH-terminal peptide of human liver manganese superoxide dismutase" J.Biol.Chem.264. 5762-5767 (1989)

Kawaguchi,T.：“抗人肝锰超氧化物歧化酶 COOH 末端肽的单克隆抗体”J.Biol.Chem.264。

Kinoshita,N.: "alpha-Fetoproteins antibody-lectin enzyme immunoassay to characterize sugar chains for the study of liver diseases." Clin.Chim.Acta. 179. 143-152 (1989)

Kinoshita,N.：“通过甲胎蛋白抗体-凝集素酶免疫分析来表征糖链，用于肝脏疾病的研究。”