糖鎖遺伝子の特異性

聚糖基因的特异性

• 批准号: 05274103
• 负责人: 谷口 直之
• 金额: $ 111.62万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 1996
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05274103/
• 关键词: 糖鎖遺伝子; 細胞導入; 遺伝子クローニング; α1-6フコシルトランスフェラーゼ; シアリルルイスX; ミドカイン; 糖鎖; 糖タンパク質; GnT-III; ベイシジン; シアル酸転移酵素; 癌細胞; Gal転移酵素; トランスジェニックマウス; シアリダーゼ; T細胞受容体

本研究では、糖鎖遺伝子であるGnT-III遺伝子の細胞導入によりGnT-IIIの産物であるbisecting GlcNAcが糖タンパク質に付加されることにより、細胞膜に存在する糖タンパク質の選別輸送が抑制され、選別輸送が反対方向へおこり、ゴルジやリソソームに蓄積された。しかし、リソソームに存在する糖タンパク質や、分泌性の糖タンパク質の選別輸送は障害されなかった。また、PC12細胞では、神経成長因子NGFのレセプターであるTrkAの糖鎖が改変され、二量体形成やクラスタリングが抑制され、細胞核への増殖シグナルが抑制され、分化が抑制された。がんの転移に密接な関係があり、転移がん細胞で著しく発現するGnT-V遺伝子の上流解析をおこない、プロトオンコジーンの転写因子Ets-1がプロモーター活性をもつことをあきらかにした。また、新しいシアル酸転移酵素遺伝子のクローニングに成功した。新しいα1-6 Fucosyl transferaseをヒトおよびブタ組織から分離精製に成功し、その遺伝子クローニングに成功した。ルイスXおよびシアリルルイスXの生合成機構と人類遺伝学的な分布をあきらかにした。また、細胞間の接着に重要なヘパリン結合性成長因子であるミドカインのヘパラン結合の分子機構と細胞生物学的意義を明らかにした。このように本研究では、糖鎖遺伝子を細胞に導入することにより、糖鎖遺伝子を発現させ、その産物である糖転移酵素を過剰発現させることにより、細胞内や細胞表面の糖タンパク質や糖脂質の糖鎖を改変させ、それらの新たに生成した糖鎖のもつ意義を明らかにすることに成功した。また、これらの糖鎖遺伝子の制御機構、細胞生物学的な意義、とくに細胞増殖、細胞接着、細胞間認識機構における糖鎖遺伝子のかかわりを解明した。

In this study, we investigated the effects of cell membrane membrane on the selective transport, inhibition, and accumulation of glycoproteins in the opposite direction during the introduction of GnT-III genes into cells and the production of GnT-III genes by bisecting GlcNAc. The selective transport of sugar and secretory sugar in the presence of a soft tissue is a barrier. In addition, PC12 cells were inhibited from growth factor NGF, TrkA and its glycogen lock, from diploid formation, from nuclear proliferation, and from differentiation. The close relationship between migration and expression of GnT-V gene is discussed in detail. The expression factor Ets-1 of GnT-V gene is used to analyze the activity of GnT-V gene. A new type of enzyme was successfully developed. The new α1-6 Fucosyl transferase was successfully isolated and purified from the tissue. The distribution of human genetics The importance of cell-to-cell interaction and binding of growth factors in cell biology has been clarified. This study was successful in clarifying the significance of glycan gene expression in intracellular and cell surface glycans and glycan lipid glycans, and in generating new glycan genes. The mechanism of control of glycogen, the significance of cell biology, cell proliferation, cell adhesion, and the mechanism of understanding between cells are explained.

项目成果

S.Yamashiro: "Substrate specificity of β1, 4-N-acetylgalalactosaminyltransferase in vitro and in cDNA-transfected cells. GM2/GD2 synthase efficientyl generates asialo-GM2 in certain cells." J.Biol.Chem.270. 6149-6155 (1995)

S.Yamashiro：“β1, 4-N-乙酰半乳糖氨基转移酶在体外和 cDNA 转染细胞中的底物特异性。GM2/GD2 合酶在某些细胞中有效生成 asialo-GM2。”J.Biol.Chem.270（ 1995)

Naoya Kojima: "Induction of cholinergic differentiation with neurite sprouting by de novo biosynthsis and expression of GD3 and b-series gangliosides in Neuro2a cells" J.Biol.Chem.269. 30451-30456 (1994)

Naoya Kojima：“通过从头生物合成和在 Neuro2a 细胞中表达 GD3 和 b 系列神经节苷脂来诱导神经突萌芽的胆碱能分化”J.Biol.Chem.269。

Makino,Y.: "Extrathymic development of V α 14 positive T cells." J.Exp.Med.177. 1399-1408 (1993)

Makino, Y.：“V α 14 阳性 T 细胞的胸腺外发育。”J.Exp.Med.177（1993）。

Huang,R.-P.: "Embigin,a member of the immunoglobulin superfamily expressed in embryonic cells,enhances cell-substratum adhesion" Dev.Biol.155. 307-314 (1993)

Huang,R.-P.：“Embigin，胚胎细胞中表达的免疫球蛋白超家族的成员，增强细胞与基质的粘附”Dev.Biol.155。

E.Miyoshi: "Transfection of N-acetylglucosaminyltransferase III gene suppresses expression of hepatitis B virus in a human hepatoma cell line, HB611." J.Biol.Chem.270. 28311-28315 (1995)

E.Miyoshi：“N-乙酰氨基葡萄糖转移酶 III 基因的转染可抑制人肝癌细胞系 HB611 中乙型肝炎病毒的表达。”