糖鎖遺伝子による細胞リモデリング

聚糖基因的细胞重塑

• 批准号: 10178104
• 负责人: 谷口 直之
• 金额: $ 183.94万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10178104/
• 关键词: 糖鎖; 糖脂質; 糖タンパク質; 複合糖質; 糖鎖リモデリング; 糖鎖遺伝子; 糖転移酵素

N-グリカンにbisectingGlcNAcを導入する糖転移酵素、GnT-IIIを導入した細胞ではEGFレセプターのエンドサイトーシスが亢進していること、またEGF刺激によるβ-カテニンのリン酸化が低下していることを見い出した。ドリコールリン酸マンノース合成酵素を制御するDPM2が、GPIアンカー合成の初期酵素をも制御することを見いだし、N型糖鎖とGPIアンカーの合成が連動していることを示した。細胞接着分子L-セレクチンの特異的リガンドと同定したシアリル6-スルホルイスxが、大腸上皮細胞に発現し、細胞の悪性化に伴って陰性化する傾向を有する事を見出した。これと対照的に、細胞が悪性化すると硫酸基を持たないシアリルルイスxの発現が増大する。正常大腸上皮細胞では、シアル酸の環状化によってセレクチンとの結合活性が調節されているが、悪性細胞ではこの調節機構が失われていることも判明した。ガングリオシド糖鎖合成に働く新しいシアル酸転移酵素遺伝子(ST6GalNAcV、VI)、およびグロボ系糖脂質合成に働くGb3合成酵素、Gb4合成酵素遺伝子を単離して機能を明らかにした。また、GM2/GD2合成酵素遺伝子ノックアウト、GD3合成酵素遺伝子ノックアウトマウスを用いて、複合型およびβ系列ガングリオシドが神経系維持と修復に必須なことを明らかにした。マウスシアル酸転移酵素のゲノム構造解析などのデータをまとめた。第3の新規Gal:→3硫酸転移酵素のcDNAクローニングを行い、O-結合型糖鎖のcore1鎖(Galβ1→3GalNAcα1→)に特異的に作用することを明らかにした。さらに基質特異性が既知のものとは異なる第4の酵素であるGal:→3硫酸転移酵素をブタ大腸から精製し、酵素学的性状を明らかにした。糖脂質硫酸転移酵素遺伝子のノックアウトマウスは、神経機能障害と精子形成障害をきたしたことから、硫酸化糖脂質のスルファチドとセミノリピドは、それぞれミエリン機能と精母細胞の分化に必須の分子であることが明らかとなった。

N-bisecting GlcNAc and GnT-III were introduced into the cells, and EGF was stimulated to increase the activity of GlcNAc. DPM2, GPI, GPI. The expression of cell adhesion molecule L-6-cell adhesion molecule in colorectal epithelial cells and the tendency of cell sex change accompanied by cell negativity have been found The development of cell culture and cell culture in response to radiation has increased. The regulation of cyclin activity in normal colon epithelial cells and the loss of regulatory mechanisms in normal colon epithelial cells were identified. Gb3 synthase, Gb4 synthase, Gb3 synthase, Gb4 synthase, GM2/GD2 Synthase Gene, GD3 Synthase Gene, Complex Type and Beta Series Gene, Needed for Neurological Maintenance and Repair The structure of the enzyme was analyzed. The third new regulation Gal:→3 Sulphate shift enzyme cDNA library, O-binding sugar lock core1 lock (Galβ1→3GalNAcα1→) specific role in this clear. The fourth enzyme is Gal:→3 Sulfuric acid transfer enzyme is purified from the large intestine, and the properties of enzymes are clarified. Glycolipid sulfate transfer enzymes are used to inhibit the development of spermatogenesis, and are essential for spermatocyte differentiation.

项目成果

Honke K., et al.: "Molecular Cloning And Characterization of A Human β-Gal 3'-Sulfotransferase Which Acts on Both Type 1 and Type 2 (Gal β,3/1,4GlcNAc-R) Oligosaccharides."J.Biol.Chem.. 276. 267-274 (2001)

Honke K. 等人：“作用于 1 型和 2 型 (Gal β,3/1,4GlcNAc-R) 寡糖的人 β-Gal 3-磺基转移酶的分子克隆和表征。”J.Biol .化学.. 276. 267-274 (2001)

Okajima,T. et al.: "Molecular cloning and expression of mouse GD1a/GT1aa/GQ1ba synthase (ST6GalNAc VI) gene."J.Biol.Chem.. 275. 6717-6723 (2000)

冈岛，T.

Memon R. A. et al.: "Regulation of glycosphingolipid metabolism in liver during the acute phase response"J. Biol. Chem.. (in press).

Memon R. A. 等人：“急性期反应期间肝脏中鞘糖脂代谢的调节”J。

Sakamoto,Y. et al.: "Molecular cloning and expression of cDNA encoding chicken UDP-GlcNAc : GlcNAcβ1-6 (GlcNAcβ1-2) Manα1-R [GlcNAc to Man]β1,4N-acetylglucosaminyltransferase VI."J.Biol.Chem.. 275. 36029-36034 (2000)

Sakamoto, Y. 等人：“编码鸡 UDP-GlcNAc 的 cDNA 的分子克隆和表达：GlcNAcβ1-6 (GlcNAcβ1-2) Manα1-R [GlcNAc 到 Man]β1,4N-乙酰氨基葡萄糖转移酶 VI。”J.Biol.Chem ..275.36029-36034 (2000)

Izawa, M., et al: "Expression of sialyl 6-sulfo Lewis x is inversely correlated with conventional sialyl Lewis x expression in human colorectal cancer."Cancer Res.. 60. 1410-1416 (2000)

Izawa, M., 等人：“唾液酸 6-磺基 Lewis x 的表达与人类结直肠癌中常规唾液酸 Lewis x 的表达呈负相关。”Cancer Res.. 60. 1410-1416 (2000)