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CEA関連抗原遺伝子の分子生物学的解析および産物の機能

CEA相关抗原基因及产物功能的分子生物学分析

基本信息

批准号：
01015093
负责人：
日野田裕治
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Sapporo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は、CEA関連抗原であるnonspecific crossreactin antigen(NCA)とbiliary glycoprotein I(BGP I)の分子生物学的解析を通じて、これら分子の機能を明らかにする点にある。本年度の研究成果として以下の点が挙げられる。i)BGP I cDNAの解析から、BGP Iには少なくとも4つのisoformが存在するがノザンブロット法による種々の細胞株や癌組織においては、3.9kbの単一のmessageのみ検出される。ii)CEA NCAの発現していない肝細胞癌においてBGP I mRNAが高率に発現することを見い出し、従来肝細胞癌に検出されていたCEA様抗原の本体がBGP Iであることを強く示唆した。iii)NCA mRNAの発現が、大腸癌において非癌部組織より明らかに強いことをin situ hybridization法を用いて明らかにし、NCAの腫瘍マーカーとしての有用性を示唆した。iv)NCA cDNAを発現ベクターに組み込み、CHOK1細胞を用いてトランスフェクトーマを作製した。v)NCAおよびBGP Iの合成ペプチドに対するモノクローナル抗体を作製し、免疫原のペプチドに強く反応するクローンを確立した。vi)BGP I cDNAの5端側をプローブとしてgenomicライブラリーをスクリーニングし、数個の陽性クローンを得た。今後はこれらの材料を用いて以下の点につき明らかにする。i)細胞質ドメインにリン酸化部位の存在が示唆されるBGP Iのリン酸化を検討する。ii)すでに報告されているCEAファミリーの接着分子としての可能性を抗ペプチドモノクローナル抗体やトランスフェクトーマを用いてNCAやBGP Iについて検討する。iii)genomicライブラリーより得たBGP Iをcodeすると思われるクローンを解析し、本遺伝子の5上流領域の配列を決定する。iv)NCAの腫瘍マーカーとしての役割をさらに明確にする。

The purpose of this study is to analyze the molecular biology of CEA antigen nonspecific crossreactin antigen (NCA) biliary glycoprotein I (BGP I). The research results of this year are listed below. I) BGP I cDNA analysis, BGP I analysis, and BGP I analysis showed that there were many kinds of cancer cell lines, such as cancer cell lines, cancer tissues, and 3.9kb cells, which were detected by message. Ii) CEA NCA showed that there was a high rate of liver cancer, CEA antigen, BGP I antigen, BGP I antigen, liver cancer, and liver cancer. Iii) NCA mRNA detection, large cancer cancer and non-cancer tissues use the in situ hybridization method to indicate the usefulness of cancer. Iv) NCA cDNA shows that the system is responsible for the system, and the CHOK1 cell is responsible for the operation of the computer. V) NCA