癌細胞における染色体変異の分子機構の解析

癌细胞染色体突变的分子机制分析

• 批准号: 01015107
• 负责人: 黒沢 良和
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Fujita Health University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01015107/
• 关键词: Neuroblastoma; Nーmyc遺伝子; 遺伝子増幅; PFG法; T細胞レセプター遺伝子; InTー6

我々は次の課題について研究を進めている。一つはNeuroblastomaにおけるNーmyc遺伝子の増幅機構の解明であり、もう一方はTリンパ系腫瘍でのT細胞レセプター遺伝子座の異常再編成と腫瘍の関係を明らかにすることである。Nーmyc遺伝子のDNA増幅について、我々は最初PFG法によってその増幅単位の大きさを検索した。その結果、Nーmyc遺伝子の比較的近傍でDNA組換えが起こっており、一方増幅単位を構成するDNAは、Nーmyc遺伝子を含むDNA以外に更に2ー3種のDNAが含まれていることがわかった。そこでpYACベクターを用いて、その増幅単位すべてをクローニングすることにした。方法は、増幅単位中に含まれる低頻度切断制限酵素部位がわずかであることを利用して、低CotでhybridをつくるDNAをクローニングしようとするもの、もう一方は大きなDNAをpYACベクターにつなぎ“chromosome walking法"で増幅単位をクローニングしようとするものである。現在、Neuroblastoma株IMRー32 DNAより、比較的大きなDNAのみを含む組換え体数百種を作製できた。更に大きなライブラリーを作製してクローニングを進めている。二番目の課題については、T細胞レセプターbeta鎖遺伝子座のDbetaーJbeta結合で染色体より切り出されたDNAが染色体6番に挿入された例について詳しく解析を進めている。挿入された部分には、癌細胞中で発現されている約3.6キロ塩基のmRNAがコードされていることが判明している。このmRNAについてほぼ全領域をカバーするcDNAクローンが単離できたのでその全構造を決定しつつある。未だこの現象が発癌と直接関係しているのか証明できていないが、塩基配列決定後は、相当するオリゴペプチドをつくり、モノクローン抗体を作製してその遺伝子の特徴付けを行なう予定である。

I want to study the topic of the second time. The abnormal recombination of T cells in Neuroblastoma cells and tumor cells The DNA amplification of N myc gene was carried out by the original PFG method. The results showed that there were two or three DNA types in the N-myc gene except for DNA. This is the first time I've ever seen a woman in my life. The method comprises the following steps of: increasing amplitude, containing low frequency, cutting off restriction enzyme sites, using low Cot, hybrid, DNA, pYAC, and increasing amplitude. Now, Neuroblastoma strain IMR-32 DNA, compare the large DNA More information on the development process The second topic is to analyze the DNA of chromosome 6 in detail. About 3.6 percent of mRNA was found in cancer cells. This mRNA is used to determine the whole structure of the cDNA library. This phenomenon is not directly related to cancer development, but is proved to be related to the determination of the base alignment. After the determination of the base alignment, it is equivalent to the determination of the characteristics of the gene.

项目成果

T.Naoe: "Diversity of cellular molecules in human cells detected by monoclonal antibodies reactive with cーmyc proteins produced in Escherichia coli." Jpn.J.Cancer Res.80. 747-745 (1989)

T.Naoe：“通过与大肠杆菌中产生的 cmyc 蛋白反应的单克隆抗体检测人类细胞中的细胞分子多样性。”Jpn.J.Cancer Res.80 (1989)。