低増殖速度連続培養細胞の細胞周期における成長様式の解析

低生长速率连续培养细胞的细胞周期生长模式分析

• 批准号: 63540517
• 负责人: 宮田 尚雄
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63540517/
• 关键词: 分裂酵母; 連続培養; ケモスタット培養; 細胞周期; 成長; 増殖; サイズ分布

連続培養法は、応用面での価値はいうまでもなく、生態のモデルシステムとしても興味深い系である。低増殖速度連続培養細胞の増殖の動態を知る一つとして、細胞周期における成長(容積増大)様式を細胞のサイズ分布から解析することを試みた。分裂酵母をC源律速合成培地で速続培養(ケモスタット、EYELA MBFー100M)した。細胞サイズは「長さ」を用い、顕微鏡写真から測定した。サイズ分布の解析は、Jamesら(1975)の方法を基に、成長誘導期(またはGo期)・新生細胞サイズ(Lb)・比サイズ成長速度(k)・成長停止期・変動係数の補正項等を導入し、シミレートした。分裂細胞サイズ(Ld)とその変動係数(a)は実測値を用いた。細胞のサイズ成長が指数関数的成長ならば、成長中の細胞のサイズ分布密度関数はV(l)=(i*2)/(k*l^<-(1+1/k)>)(l=L/Lb,1<l<Ld/Lb)(i:成長開始から分裂までの細胞周期にある細胞の割合;L:細胞サイズ)で表わされ、成長停止期細胞(サイズ:Ld)の割合は〓^1_<xd>i*log2*2^<1-×>dx(0<x<1)(xdは細胞がLdに達する細胞周期の点で、xd=logLd/(k*log2)(0<xd<1))、成長誘導期細胞(サイズ:Lb)の割合は1ーiとなる。細胞集団を扱うために、細胞サイズの変動係数をCV(L)=a+b(Ld/L-1)(b:定数)で与え、理論上のサイズ分布を実測のサイズ分布と一致させた。この方法によって、1.細胞周期におけるサイズ成長は、誘導期・成長期・停止期からなり、成長は指数関数的である、2.増殖速度の遅い程、誘導期の割合が長く、停止期の割合は短かい、3.高増殖速度培養の分裂細胞サイズは、高増殖速度バッチ培養細胞の分裂サイズより大きいが、増殖速度が遅くなるとサイズは小型化する、等を得た。これらの結果をマイクロ培養細胞(培地を還流)の成長様式(個々の細胞の連続観察から解析)と比較検討中。

The method of continuous cultivation is to use the surface value of the medium, the ecological value of the medium and the interest of the medium. Low growth rate, continuous growth dynamics of cultured cells, cell cycle, growth (capacity growth), cell distribution, and analysis Yeast split C source law rapid synthesis culture ground rapid culture (, EYELA MBF-100 M) Cell phone number: "long","micro","long" Analysis of the distribution of cell growth, James (1975) method, induction period, neonatal cell growth rate, growth stop period, correction term of dynamic coefficient, etc. are introduced. Divided cells (Ld) Cell growth index, cell growth index distribution density index V(l)=(i*2)/k*l^&lt;-(1+1/k)&gt;(l=L/Lb,1&lt;l&lt;Ld/Lb)(i: cell cycle division at the beginning of growth;L: cell cycle at the beginning of growth)($&gt;:Ld)^1_<xd>i* log2 *2^&lt;1-×&gt;dx(0&lt;x&lt;1)(xd=logLd/(k* log2)(0 &lt;xd&lt;1)), cell cycle point at which cells reach Ld, cell cycle point at which cells reach Ld. Cell aggregation coefficient CV(L)=a+b(Ld/L-1)(b: constant) is consistent with theoretical distribution. The method includes: 1. Cell cycle development, induction, growth, and rest periods; 2. Growth rate development, induction, and rest periods; 3. High growth rate culture of mitotic cells; 4. High growth rate culture of mitotic cells; Wait for it. The growth model of cultured cells (cultured cells) and the analysis of cell culture were compared.

项目成果

Miyata,H: J.Cell Sci.

宫田，H：《细胞科学杂志》。